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主题：【讨论】如何平衡色谱柱？色谱柱平衡小Tips～～

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happytiankong1
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发表于：2015/05/07 17:20:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
      反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的；由于色谱柱在储存或运输过程中固定相可能会干掉，这会引起键合相的空间结构发生变化。因此，新的色谱柱在用来分析样品之前，请一定要充分平衡色谱柱。
反相色谱柱的平衡方法如下：以纯乙腈或甲醇作流动相，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜（请注意断开检测器！），然后，将流速增加到0.8ml/min冲洗30分钟既可以进行样品的分离。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意首先用20倍柱体积的5％的乙腈/水流动相“过渡”，然后使用分析样品的流动相直至得到稳定的基线

 
*  相对于反相色谱柱来讲，硅胶柱或极性色谱柱需要更长的时间来平衡：这些色谱柱在出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果极性色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇会异丙醇平衡
 
*  请注意将预柱和分析柱一起平衡
每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!
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2015/5/8 9:50:26 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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2015/5/8 9:51:43 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以纯乙腈或甲醇作流动相，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜（请注意断开检测器！）。平衡色谱柱，断开检测器的有何目的
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symmacros
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2015/5/9 22:30:41 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
以纯乙腈或甲醇作流动相，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜（请注意断开检测器！）。平衡色谱柱，断开检测器的有何目的
我也没有断开检测器。
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20071940xu
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2015/5/11 9:18:02 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡色谱柱很重要  如果平衡不好  检测样品是出峰效果不好
该帖子作者被版主 happytiankong1加 10积分， 2经验，加分理由：感谢分享
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happytiankong1
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2015/5/11 14:10:40 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
以纯乙腈或甲醇作流动相，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜（请注意断开检测器！）。平衡色谱柱，断开检测器的有何目的
个人认为，断开检测器的目的，主要是为了防止在平衡过程中，将杂质带入检测器
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夏天的雪
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2015/5/11 16:38:15 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 symmacros(jimzhu) 发表:
我也没有断开检测器。
平时平衡色谱柱一般都不断开的，如果色谱柱有污染或者反冲之类的才断开
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夏天的雪
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2015/5/11 16:42:18 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 happytiankong1(happytiankong1) 发表:
个人认为，断开检测器的目的，主要是为了防止在平衡过程中，将杂质带入检测器
应该是的，但是平衡的时候都不断开的，偷懒了
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symmacros
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2015/5/11 19:26:19 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
平时平衡色谱柱一般都不断开的，如果色谱柱有污染或者反冲之类的才断开
谢谢进一步解释。
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