主题:【原创】【色谱技巧】毛细管电泳法操作经验分享

浏览0 回复10 电梯直达
nini2006
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这是我多多师父发起的一个5月份的活动,说过要支持的,要说到做到。月末了,今天搜肠刮肚,把几年来做CE的经验跟大家分享一下,不多,但希望对大家有用。
1 断流的可能原因
        a、有气泡。解决办法:所有进入毛细管的液体都要超声排气,特别是容易起气泡的溶液,如SDS。
        b、有沉淀物。解决办法:所有进入毛细管的液体都要过滤,滤膜孔径要比毛细管内径小。
        c、毛细管有裂口,最容易裂的地方是窗口处和毛细管出口端,有时候看不出来,因为加压注水的时候仍能看到液滴出来,需要用手碰一碰才能发现。
2 基线漂移
        a、毛细管没活化好:需要用0.1 M氢氧化钠多冲一冲
        b、毛细管没平衡好:冲完氢氧化钠和水后需要用buffer再冲一段时间,这个时间得根据buffer的组成而定。必要时候需要跑空白一段时间。
        c、灯接近寿命:查看灯的使用时间,如果已经两千多个小时接近三千小时的话,可以考虑换灯了。
        d、毛细管寿命已到。毛细管是有使用寿命的,这个寿命长短说不好,得看你怎么保养,当然,还跟使用的buffer有关。有些buffer特别伤管子的。
3 常见缓冲溶液的使用
          缓冲溶液一般是先配好stock solution,使用的时候再进行稀释。但是stock solution也不能长时间存放,0.1 M 的磷酸、硼砂等溶液常温下一个星期就会有变化,再长时间可以看到有沉淀析出。但是也不能因此放到冰箱去,因为放到冰箱也会有沉淀析出,最好常温存放,然后每星期重配一次。另外,配置硼砂的时候要稍微加热帮助溶解,不然溶解不了。但加热也不要太猛烈,不然溶解效果也是不好。
4 sds使用注意事项
sds在配置过程中容易产生气泡,所以如果用容量瓶来配置是不实际的。这时候就不能对sds的浓度做精确要求。所以,一般用量筒或者离心管配置就好了,加水的时候用玻棒引流,小心的搅拌,边配置边超声促进溶解。
5 毛细管的使用和维护
避免用强碱溶液长时间冲洗,比如1 M氢氧化钠,内壁会被腐蚀的。长时间不用的时候应该吹干,两端密封保存。也有人建议用水封存。
6 UV灯的使用注意事项
不要暴力关电,要在操作界面按关灯键。一般不超过两小时暂停检测不需要关灯,因为开关灯都是会对灯造成损害的。
该帖子作者被版主 老多_小多20积分, 2经验,加分理由:活动奖励
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CEcret
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老多_小多
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看的出来是百忙中写的经验,不错,辛苦
不错的分享,都可以让大家好好学习
nini2006
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原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
看的出来是百忙中写的经验,不错,辛苦
不错的分享,都可以让大家好好学习
必须哒,铁杆粉丝嘛~
山大的邻居
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wy20071722
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nini2006
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原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
真是实用的,都是平时亲自操作的分享啊!
是的哟
hjbfrasm
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ericwong
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很多时候第一手的经验是最珍贵的。
就像现在并不缺乏大学生,缺少的是各个工种的八级工。
隆美尔
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chinarenm
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