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凝胶色谱（GPC）

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主题：【讨论】gpc标曲一直做不好，求指导

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tiantangya

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发表于：2015/06/12 15:50:27 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

实验室用的岛津gpc，rid-10a的检测器，今年新买了根柱子，第一次用先做标曲，用的是聚苯乙烯，4个分子量：1300， 2200 ，5200， 13000.做完样后按照仪器的操作说明做了标曲，普适校正，k值是0.00016,&是0.706。然后做了标曲，算出来的分子量很怪，是不是和我检测时的温度有关，检测时温度是35度，但是我没找到相关的k值，就用了25度时的参数。还有gpc柱子的使用说明说柱子要和检测器温度相同，但是检测器开的时间长了温度会上升，怎么设置？怪了我上不了图片，先附上pdf。望各位不吝赐教。

附件：

IMAG0367.pdf

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2015/6/13 10:32:25 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

帮你把图直接附上来了，拟合的曲线不对，你用一根柱子，若是均匀的粒径，孔径的，用一次函数拟合就可以，你搞成三次函数了。
另你这是什么柱子？分离的分子量那么小，混标是你买的还是现成的产品？一般现成的四种混标分子量不会相差那么小，你能把谱图传上来吗？
那你样品的分子量大概或理论为多少呢？出峰时间在什么位置？是否这个柱子和流动相能满足你的要求？

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tiantangya

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2015/6/15 8:54:38 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 小不董(doxw0323) 发表:

帮你把图直接附上来了，拟合的曲线不对，你用一根柱子，若是均匀的粒径，孔径的，用一次函数拟合就可以，你搞成三次函数了。
另你这是什么柱子？分离的分子量那么小，混标是你买的还是现成的产品？一般现成的四种混标分子量不会相差那么小，你能把谱图传上来吗？
那你样品的分子量大概或理论为多少呢？出峰时间在什么位置？是否这个柱子和流动相能满足你的要求？

感谢版主指教。我是用的三次方程拟合的，但是以前做的时候可能也是用的三次拟合，不过我也不确定，之前不是我做的标曲。柱子用的是东曹的g3000hxl。标样是聚苯乙烯，1300，2200， 5200， 13000 ，不知你说的混标什么意思，我们是一瓶一瓶的。样品分布是从几百到一万多。柱子是跟以前用的那根是一个型号的，满足要求是可以的。现附上标线谱图，请您再指点。我还是上传不了图片，不知是不是浏览器问题。麻烦版主再传一下。

附件：

IMAG0370.pdf

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