紫外可见分光光度计(UV)

主题:【新手求助】求助:关于紫外含量稀释倍数计算

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王小露
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求助:最近刚到一个公司,突然发现他们的紫外检验记录的计算和自己以前的不一样!现在向各位前辈求证,看哪种算法正确,关于某产品药典要求是这样子的:

对照品溶液的制备  取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖60mg,精密称定,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水葡萄糖0.6mg)。

标准曲线的制备  精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml,分别置50ml量瓶中,各加水至刻度,摇匀。分别精密量取上述溶液2ml,置具塞试管中,各精密加4%苯酚溶液1ml,混匀,迅速精密加入硫酸7ml,摇匀,置40℃水浴中保温30分钟,取出,置冰水浴中放置5分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ A)在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

测定法  取金樱子肉粗粉约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加水50ml,称定重量,静置1小时,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取25ml,置50ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密量取2ml,置具塞试管中,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加4%苯酚溶液1ml"起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中金樱子多糖的重量(μg),计算,即得。


他们的计算:
对照品浓度

0.6

mg/ml

标准曲线     
取样量(ml)

0.5

1

1.5

2

2.5

浓度C(mg/ml)

0.012

0.024

0.036

0.048

0.06

吸光度A

0.095

0.198

0.322

0.438

0.562

标准线性是:y=9.7833x-0.0292
供试品:m1=0.5014g    m2=0.5008        水分:10.1%
吸光度:A1=0.203      A2=0.201
含量1=(0.203+0.0292)/9.7833*50/2*100/25*50/1/0.5014/1000/(1-10.1%)*100=26.3671%
含量2=(0.201+0.0292)/9.7833*50/2*100/25*50/1/0.5008/1000/(1-10.1%)*100=26.1316%

平均值=26.2293%
我原来公司计算是这样的:
对照品浓度

0.6

mg/ml

标准曲线     
取样量(ml)

0.5

1

1.5

2

2.5

浓度C(mg/ml)

0.006

0.012

0.018

0.024

0.03

吸光度A

0.095

0.198

0.322

0.438

0.562


标准线性是:y=19.567x-0.0292
供试品:m1=0.5014g    m2=0.5008        水分:10.1%
吸光度:A1=0.203      A2=0.201
含量1=(0.203+0.0292)/19.567*50*100/25*50/1/0.5014/1000/(1-10.1%)*100=26.3265%
含量2=(0.201+0.0292)/19.567*50*100/25*50/1/0.5008/1000/(1-10.1%)*100=26.1311%

平均值=26.2288%
请问哪个计算是正确的???


你们一般是怎么算的?有些人有说方法不对,可这个检测方法是2010年版药典一部“金樱子”含量检测项下要求的检测方法也!有些人有说标准曲线溶液稀释倍数计算错误,说是还有除以10,即7+1+2=10ml,但我个人认为不同介质液体的体积混合,总体积不能是简单的个成分体积简单相加也,又有些人说标准曲线浓度有问题,不能是0.0012mg/ml 因为太小了,检测不出!现在我蒙了!为何都是药典要求这方法,为何大家的看法都不一样呢?到底是怎么计算才对呢???求解
该帖子作者被版主 过年杀只猪5积分, 2经验,加分理由:悬赏
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可乐20150313
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下面那个是对的。取0.5毫升的算法:0.06*0.05=0.3,0.3/50=0.006.你配置的葡萄糖是0.6mg/ml.那么0.5毫升含葡萄糖就是0.3mg.然后0.3mg又溶解在50ml 容量瓶中,不就是0.006mg/ml啊。
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