主题：【第九届原创】草根比对37期实验过程(作业贴)

草根比对37期实验过程

背景：7月份参加了由仪器信息网举办的第37期草根比对，果汁中苯甲酸的检测。参照GB/T 5009.29-2003 食品中山梨酸、苯甲酸的测定中 液相色谱法进行测试。

说点题外话，这次草根比对实验的准备工作做得相当的好。资料及物品准备得很充分，感谢仪器信息网及广州市尤瓦化工产品有限公司的付出。见下图（非广告！但有广告嫌疑！！！^_^）

样品和标准品如下：

证书如下：

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器：WATERS UPLC H-class 配PDA检测器；

1.1.2 溶剂：乙酸铵（色谱纯），碳酸氢钠（分析纯），氨水（分析纯）；

1.1.3 流动相：甲醇（色谱纯），自制超纯水；

1.1.4 标准品：苯甲酸（提供）；

1.2 实验方法

参照GB/T 5009.29-2003 食品中山梨酸、苯甲酸的测定；

1.3 标准溶液的配置

取0.1000g苯甲酸标准品于100mL容量瓶中，加5mL 20g/L碳酸氢钠溶液，超声溶解后加水定容至刻度，配成1mg/mL的储备液。

1.4 实验条件

1.4.1 色谱柱：BEH C18 2.1X100mm,1.7μm。

1.4.2 流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵溶液=10:90

1.4.3 流速：0.3mL/min。

1.4.4 进样量：1μL。

1.4.5 检测器：PDA eλ检测器，230nm。

1.5 实验过程

1.5.1 取出水果汁样品，用pH试纸测试水果pH。结果发现水果汁pH在6-7之间。

1.5.2 取1.0000g水果汁于10mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，超声混匀后用0.22μm滤膜过滤后待测。（因水果汁pH在6-7之间，所以无需用氨水调pH。）

1.5.3 取1.0mL储备液于10mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，超声混匀后用0.22μm滤膜过滤后待测。

1.5.4 将标准溶液与样品溶液进行检测，对比谱图峰面积，如下图。计算样品大概浓度后配制一系列相应标准浓度，使样品浓度在标准曲线范围内。

1.5.5 直接对水果汁原液和水果汁稀释液进行测试。并进行加标回收率测试。

2 结果与讨论

苯甲酸的标准曲线如下：

通过峰面积代入标准曲线计算水果汁中苯甲酸的含量。实验结果发现水果汁含量比较低，所以直接测试水果汁原液，可减少稀释过程所带来的误差。

3 结论

3.1 苯甲酸在碳酸氢钠溶液中溶解较慢，所以用超声辅助溶解。

3.2 因样品量较少，所以并没有对果汁原液测量pH值，只用pH试纸进行测试。结果发现pH呈中性，所以样品配制过程中并没有用氨水调pH。

3.3 国标方法中的流动相为甲醇：0.02mol/L乙酸铵溶液=5:95，因仪器及色谱柱不同，调整方法后改为甲醇：0.02mol/L乙酸铵溶液=10:90。