主题:【第九届原创】小儿热速清口服液中黄芩苷含量测定方法的改进

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9月三等奖
小儿热速清口服液,中成药名。为清热剂,具有清热解毒,泻火利咽之功效。主治小儿外感风热所致的感冒,症见发热、头痛、咽喉肿痛、鼻塞流涕、咳嗽、大便干结。由柴胡、黄芩、板蓝根、葛根、金银花、水牛角、连翘、大黄组成。方中柴胡疏散退热;黄芩清热袪火,袪上焦热毒;板蓝根清热解毒,凉血利咽;葛根发汗解表,助柴胡解肌退热;水牛角苦咸性寒,清热凉血解毒,寒而不遏,且能散瘀;金银花、连翘清热解毒,清宣透邪,使营分之邪透出气分而解;大黄清热解毒,泻下攻积,釜底抽薪。全方共奏清热解毒,泻火利咽之功。
目前2015版药典中测定小儿热速清口服液黄芩苷是通过大孔树脂来分离,过程较为繁琐。为此,我们探索出了一种简便的方法来测定其中的黄芩苷,结果证实方法稳定可靠!
1.      仪器与试药
1.1仪器

Ultimate 3000 高效液相色谱仪(赛默飞公司,DAD检测器)、
KQ-250B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)
1.2 试药
黄芩苷对照品购于中国食品药品检定研究院,批号:110715-201117,纯度91.7%甲醇为色谱纯,其余为分析纯,水位重蒸水。
2.      方法与结果
2.1  对照品溶液的制备:
精密称取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml 约含0.1mg的溶液。
2.2  供试品溶液的制备:
精密量取小儿热速清口服液3Ml,置于50ml量瓶中,加入50%甲醇适量,超声处理20min,,放冷,用50%甲醇补足至刻度,摇匀,即得。
2.3色谱条件:
色谱柱:Phenomennex Luna C18  (250mm×.4.6mm.×5um)
流动相:甲醇-0.2%磷酸水=40:60
检测波长:280nm
柱温:35℃
2.4系统适用性试验考察
分别精密吸取对照品溶液2ul、4ul、6ul、8ul、10ul以及样品溶液按2.3项下的色谱条件进行测定,记录色谱图,发现黄芩苷与其他成分完全分开,色谱峰的分离度大于1.5。
2.5 线性关系考察
分别精密吸取2ul、4ul、6ul、8ul、10ul按2.3项下注入液相色谱仪,以对应色谱峰面积为纵坐标,浓度为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程,y=42.699x+0.140,r=0.9998,结果表明黄芩苷在0.2164ug-1.0820ug之间线性关系良好。
2.6精密度试验
取对照品溶液进样,连续进样 5 次,得黄芩苷对照品面积RSD为0.67%,表明精密度良好。
2.7稳定性试验,取按2.2项下制备的供试品溶液,分别与配制后的0、2、6、8、10、12、24h按2.3项下测定供试品中的黄芩苷的面积,结果表明峰面积的RSD为0.82%,表明供试品溶液在24h稳定。
2.8重复性试验
按2.2项下制备6份供试品溶液,按2.3项下进行测定,结果样品中黄芩苷含量分别为3.02mg/ml,3.08 mg/ml,3.06 mg/ml,3.04 mg/ml,3.03mg/ml,3.01mg/ml,RSD为0.68%,表明该测定方法重复性较好。
2.9 加样回收率试验
精密量取6份供试品取1ml,分别精密加入对照品适量,按2,.2方法项下制备6份供试品溶液,按2.3项下进行测定计算黄芩苷的平均回收率和RSD。结果黄芩苷的平均回收率为98.5%,RSD为1.43%
2.10 样品测定见表1
 
样品黄芩苷含量(mg/ml)
13.02
23.13
33.24
43.09
53.11
63.04


                                                      图1  黄芩苷对照品的HPLC图

                                                    图2  小儿热速清口服液的HPLC图
3小结与讨论:

3.1  本文采用超声提取方法,改进了药典中小儿热速清口服液黄芩苷测定方法,结果表明改进的方法提取效率较高,方法稳定、可靠。
3.2    本文比较了甲醇-水-磷酸,乙腈-水,甲醇-水系统,结果表明甲醇-0.2%磷酸进行分析效果较好,基线平稳,分离度较好.
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原文由 焦点云搜(v3169866) 发表:
测定出来的结果  作用是啥
一般是用于感冒
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