主题：【分享】食品安全国家标准 食品中铅的测定 (征求意见稿)

                                                          食品安全国家标准 食品中铅的测定 (GB5009.12-xxxx征求意见稿)
前  言

本标准代替GB/T 5009.12-2010 《食品中铅的测定》、GB/T 20380.3-2006《淀粉及其制品 重金属含量 第3部分：电热原子吸收光谱法测定铅含量》、GB/T 23870-2009 《蜂胶中铅的测定 微波消解-石墨炉原子吸收分光光度法》、NY/T 1100-2006《稻米中铅、镉的测定 石墨炉原子吸收光谱法》、SN/T 0447-1995《出口饮料中铅、铜、镉的测定》、SN/T 0778-1999《出口大米中铜、锌、铅、镉的测定方法原子吸收分光光度法》、SN/T 0851-2000《进出口肉类罐头中铅、镉的检验方法原子吸收光谱法》、SN/T 2211-2008《蜂皇浆中铅和镉的测定 石墨炉原子吸收光谱法》、GB/T18932.12-2002《蜂蜜中钾、钠、钙、镁、锌、铁、铜、锰、铬、铅、镉含量的测定方法 原子吸收光谱法》
本标准将以上标准进行了同类合并，主要整合如下：
——样品前处理删除干法灰化和过硫酸铵灰化法；
——删除氢化物原子荧光光谱法、火焰原子吸收光谱法、二硫腙比色法、单扫描极谱法；
——基体改进剂采用磷酸二氢铵-硝酸钯混合溶液；
——增加电感耦合等离子体光谱法,见《多元素测定方法——电感耦合等离子体光谱法》
——增加电感耦合等离子体质谱法,见《多元素测定方法——电感耦合等离子体质谱法》
食品安全国家标准
食品中铅的测定
1  范围
  本标准规定了食品中铅含量的石墨炉原子吸收光谱测定方法。
  本标准适用于各类食品中铅含量的测定。
2  原理
试样经消解处理后,采用石墨炉原子吸收光谱法，在283.3 nm处测定的吸收值在一定浓度范围内与铅含量成正比，与标准系列比较定量，得出试样中铅的含量。
3  试剂和材料
注：除非另有规定，本方法所用试剂均为优级纯，水为GB/T 6682规定的二级水。所用试剂用时现配。
3.1 试剂
3.1.1  硝酸（HNO₃）。
3.1.2  高氯酸（HClO₄）。
3.1.3  磷酸二氢铵（NH₄H₂PO₄）。
3.1.4  硝酸钯 [Pd(NO₃)₃]。
3.2  试剂配制
3.2.1  硝酸溶液（5＋95）：量取50 mL硝酸慢慢倒入950 mL水中，混匀。
3.2.2  硝酸溶液（1＋1）：量取250 mL硝酸慢慢倒入250 mL水中，混匀。
3.2.3  磷酸二氢铵-硝酸钯混合溶液：称取0.020 g硝酸钯，加硝酸溶液（3.2.2）溶解后，在加入2.0 g磷酸二氢铵一并溶解，最后用硝酸溶液（3.2.1）定容至100 mL，混匀。
3.3  标准品
3.3.1  金属铅：纯度>99.99%。或铅标准溶液(1000 μg/mL)。
3.4  标准溶液配制
3.4.1  铅标准储备液（1000 mg/L）：准确称取1.000 g 金属铅（99.99%），分次加少量硝酸（3.2.2），加热溶解，总量不超过37 mL，移入1000 mL容量瓶，加水至刻度。混匀。此溶液每毫升含1.0 mg铅。
3.4.2  铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0 mL 于100 mL 容量瓶中，加硝酸（3.2.1）至刻度。如此经多次稀释成每毫升分别含0，5.00，10.0，20.0，30.0，40.0 ng 铅的标准使用液。
4 仪器设备
    注：所有玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內罐均需硝酸（1+5）浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用二级纯水冲洗干净。
4.1  原子吸收光谱仪，配石墨炉原子化器，附铅空心阴极灯。
4.2  微波消解系统，配有消解内罐。
4.3  可调式电热炉。
4.4  可调式电热板。
4.5  压力消解器，配有消解内罐。
4.6  恒温干燥箱。
4.7  天平，感量0.1 mg,1 mg。
5  分析步骤
5.1  试样的预制备
5.1.1 在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。
5.1.2 粮食、豆类去杂物后，磨碎，储于塑料瓶中，保存备用。
5.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，及时称取测定。
5.1.4 饮料、酒、醋、酱油等液体试样，可直接取样测定。
5.2 试样前处理
5.2.1 微波消解
称取试样0.2 g～0.6 g（精确至0.001g）于微波消解罐中，加入5 mL硝酸，按照微波消解的操作步骤消解试样，消解条件参考附录A。冷却后取出消解罐，在电热板上于140℃～160℃赶酸至0.5 mL～1.0 mL。消解罐放冷后，将消化液转移至10 mL容量瓶中，用少量水洗涤消解罐2～3次，合并洗涤液，用水定容至刻度，混匀备用。同时做试剂空白试验。
5.2.2 湿法消解
称取试样0.5 g～3 g（精确至0.001g）于带刻度消化管中，加入10 mL硝酸、0.5 mL高氯酸，在可调式电热炉上消解（参考条件：120℃/0.5h～1h、升至180℃/2h～4h、升至200℃～220℃）. 若消化液呈棕褐色，再加硝酸，消解至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，取出消化管，冷却后用水定容至10 mL，混匀备用。同时做试剂空白试验。
5.2.3 高压罐消解
称取试样0.3 g～1 g（精确至0.001g）于消解内罐中，加入5 mL硝酸。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，于140℃～160℃下保持4 h～5 h。在箱内自然冷却至室温，缓慢旋松外罐，取出消解内罐，放在可调式电热板上于140℃～160℃赶酸至0.5 mL～1.0 mL。冷却后将消化液转移至10 mL容量瓶中，用少量水洗涤内罐和内盖2～3次，合并洗涤液于容量瓶中并用水定容至刻度，混匀备用。同时做试剂空白试验。
5.2.4 直接稀释
    称取液体试样0.5～2 g（精确至0.001 g）于10 mL容量瓶中，加水至刻度。同时做试剂空白试验。
5.3  测定
5.3.1  仪器测试条件
    根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为：波长283.3 nm,狭缝 0.5 nm,灯电流8 mA～12 mA。 升温程序参考附录B。
5.3.2  标准曲线的制作
将标准系列工作液按浓度由低到高的顺序分别取10 μL、硝酸钯-磷酸二氢铵混合溶液5 μL（可根据使用仪器选择最佳进样量），注入石墨管，原子化后测其吸光度值，以浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
5.3.3  试样测定
在与测定标准溶液相同的实验条件下，将空白溶液和样品溶液分别取10 μL，硝酸钯-磷酸二氢铵混合溶液5 μL（可根据使用仪器选择最佳进样量），注入石墨管，原子化后测其吸光度值，与标准系列比较定量。
对于直接稀释法制备的样液，将空白溶液和样品溶液分别取10 μL，硝酸钯-磷酸二氢铵混合溶液5 μL（可根据使用仪器选择最佳进样量），注入石墨管，原子化后测其吸光度值，以标准加入法为校正模式测定。
6  分析结果的表述
          （C-C₀）×V
X = ————————  …………………………（1）
            m×1000
式中：
X ——试样中铅的含量，单位为毫克每千克（mg/kg)；
C ——测定样液中铅的含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
C₀ ——空白液中铅的含量，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V ——试样消化液的定容总体积，单位为毫升（mL）；
m ——试样称样量，单位为克（g）。
当铅含量≥1mg/kg时，计算结果保留三位有效数字，当铅含量＜1mg/kg时，计算结果保留两位有效数字。
7  精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。
8  其它
以称样量0.5 g，定容至10 mL计算，方法检出限（LOD）为 0.015 mg/kg，定量限（LOQ）为 0.04 mg/kg。
附  录A

微波消解升温程序

步骤	功率变化1200 W	设定温度	升温时间	恒温时间
	%	℃	min	min
1	0-80	120	5	5
2	0-80	160	5	10
3	0-80	180	5	10

附  录B
石墨炉原子吸收法参考升温程序

元素	波长	狭缝	灯电流	干燥	灰化	原子化
	nm	nm	mA	℃/ S	℃/ S	℃/ S
铅	283.3	0.5	8～12	85～120/ 40～50	750 /20～30	2300/ 4～5

《食品安全国家标准 食品中铅的测定》(征求意见稿)

编制说明

一、标准起草的基本情况（包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人等）
为贯彻落实《食品安全法》及其实施条例，依据《国家卫生计生委办公厅关于印发食品安全国家标准整合工作方案的通知》（国卫办食品函〔2014〕386号）要求，食品安全国家标准审评委员会秘书处推荐由广东疾病预防控制中心负责开展《食品中铅的测定》检测方法整合修订工作。需要整合的标准涉及卫生、农业、国家质量监督检验检疫总局、国家出入境检验检疫行业标准等行业和部门共9项标准，分别为GB/T 5009.12-2010 《食品中铅的测定》、GB/T 20380.3-2006《淀粉及其制品 重金属含量 第3部分：电热原子吸收光谱法测定铅含量》、GB/T 23870-2009 《蜂胶中铅的测定 微波消解-石墨炉原子吸收分光光度法》、NY/T 1100-2006《稻米中铅、镉的测定 石墨炉原子吸收光谱法》、SN/T 0447-1995《出口饮料中铅、铜、镉的测定》、SN/T 0778-1999《出口大米中铜、锌、铅、镉的测定方法原子吸收分光光度法》、SN/T 0851-2000《进出口肉类罐头中铅、镉的检验方法原子吸收光谱法》、SN/T 2211-2008《蜂皇浆中铅和镉的测定 石墨炉原子吸收光谱法》、GB/T18932.12-2002《蜂蜜中钾、钠、钙、镁、锌、铁、铜、锰、铬、铅、镉含量的测定方法 原子吸收光谱法》。广东省疾病预防控制中心承担该项国标整合修订工作后，成立了由广东省疾病预防控制中心胡曙光、苏祖俭、梁旭霞、广州市疾病预防控制中心彭荣飞、清远市疾病预防控制中心何健飞、河源市疾病预防控制中心黄振波、肇庆市疾病预防控制中心欧天成和湛江市疾病预防控制中心苏思群等技术人员组成的工作小组。工作组于2014年开展了实验室方法研究实验，并对我省主要食品中铅的本底值进行测定，研究讨论了相关实验结果和检测数据，对《GB 5009.12-2010 食品中铅的测定》等方法作了一定的修订，初步形成本国家标准的征求意见稿及编制说明。供讨论。
二、标准的重要内容及主要修改情况
铅和其化合物对人体各组织均有毒性，中毒途经可由呼吸道吸入其蒸气或粉尘，然后呼吸道中吞噬细胞将其迅速带至血液；或经消化道吸收，进入血循环而发生中毒。铅的测定方法主要有石墨炉原子吸收光谱法、氢化物原子荧光光谱法、火焰原子吸收光谱法、二硫腙比色法、单扫描极谱法等。其中石墨炉原子吸收光谱法灵敏度高、抗干扰强、仪器国产化、测试成本低，为实际工作所采用。本次修订主要对GB 5009.12-2010等的修改为：保留石墨炉原子吸收光谱法。暂不把适用性较差的氢化物原子荧光光谱法列入，同时灵敏度低、稳定性差、步骤繁琐的火焰原子吸收光谱法、二硫腙比色法、单扫描极谱法也不再列入；样品前处理方式拟保留湿法消解、高压罐消解和微波消解法，同时容易造成损失的干法灰化和过硫酸铵灰化法不再列入；基体改进剂修改为磷酸二氢铵-硝酸钯混合溶液。具体实验结果如下：
（1）石墨炉升温程序：将仪器性能调至最佳状态，分别做吸光度与灰化温度和原子化温度曲线。在最大的吸光度处得到最佳的灰化温度为750℃，最佳的原子化温度为2300℃。
（2）确定磷酸二氢铵-硝酸钯混合溶液为基体改进剂：根据文献以及模拟基体和实际样品实验发现：检测中以0.2g/L硝酸钯和20 g/L的磷酸二氢铵为混合基体改进剂，方法的灵敏度和线性比不加基体改进剂或其他单一基体改进剂（例如磷酸二氢铵、硝酸钯、硝酸镁和磷酸）都要好，精密度更好，灰化温度也有所提高。故以0.2g/L硝酸钯和20 g/L的磷酸二氢铵混合溶液取代磷酸二氢铵作为基体改进剂。
（3）消化用酸及用量的选择：通过改变加入各种酸的浓度，研究各种酸对测定结果的影响，发现在硝酸酸度在5%以下，高氯酸酸度在0.5%以下，测定结果没有影响；而随着盐酸和硫酸酸度的增加，铅含量的测定结果逐渐变小。因此硝酸、高氯酸可作为食品中铅测定的消解用酸，盐酸和硫酸不适合用作消化试剂。
（6）采用微波消解和湿法消解分别消解国家标准参考物质茶叶（GBW10016）、湖南大米（GBW10045）等样品，测定结果没有显著性差异。采用微波消解和高压罐消解方法分别消解圆白菜(GBW10014)、大米(GBW10010)、大虾(GBW10050)、猪肉(GBW08552)、蒜粉(GBW10022)等标准参考物质，测定结果没有显著性差异。
（6）酸消解-标准曲线法线性范围和方法检出限：经过多次实验（n>50）确定铅测定的线性范围是：2.0～40.0 μg/L。根据测定检出限的方法，测定铅的检出限。铅含量测定的线性方程为y = 0.00821x -0.00047，相关系数(R2)为0.9996。制备21份试剂空白，测定并计算得到检出限为0.6 μg/L。以称样量0.5g,定容至10mL计，该方法检出限为12 μg/kg，定量限为40 μg/kg。
（7）酸消解-标准曲线法精密度：采用两种消解方式，随机选择某大米和酱油样品，分别平行制备7份，测定样品中铅的含量，计算相对标准偏差（RSD %），精密度为2.9 %～4.5 %，满足GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》测定要求。
（8）酸消解-标准曲线法准确度：测定茶叶（GBW10016）、湖南大米（GBW10045）、圆白菜(GBW10014)、大米(GBW10010)、大虾(GBW10050)、猪肉(GBW08552)、蒜粉(GBW10022)等样品，测定值与标准值或参考值比较，结果满意。采用两种消解方式，随机选择某大米和酱油样品，在这两种样品中加入高、中和低三浓度水平的标准溶液，测定样品的加标回收率。该方法测定食品中铅的平均加标回收率为90 %～109 %。
（9）直接稀释-标准加入法线性范围和方法检出限：经过多次实验确定铅标准加入法测定的线性范围是：1.8～40.0 μg/L。根据测定检出限的方法，测定铅的检出限。铅含量测定的线性方程为y = 0.00320x +0.00857，相关系数(R2)为0.9986。制备21份试剂空白，测定并计算得到检出限为0.5 μg/L。以称样量0.5g,定容至10mL计，该方法检出限为10 μg/kg，定量限为36 μg/kg。
（10）直接稀释-标准加入法精密度：采用直接稀释-标准加入法，随机选择高盐基质食品某酱油、精制盐和味精样品，分别平行制备7份，测定样品中铅的含量，计算相对标准偏差（RSD %），精密度为2.1 %～4.6 %，满足测定要求。
（11）直接稀释-标准加入法准确度：采用直接稀释-标准加入法，随机选择高盐基质食品某酱油、精制盐和味精样品，在这三种样品中加入高、中和低三浓度水平的标准溶液，测定样品的加标回收率。该方法测定食品中铅的平均回收率为90 %～106 %。
三、国际国内标准情况
国外发布的食品中铅的标准检测方法包括：欧盟发布了《EN 14082-2003 Foodstuffs -Determination of trace elements - Determination of lead, cadmium, zinc, copper, iron and chromium by atomic absorption spectrometry (AAS) after ash drying》、《EN 14083-2003 Foodstuffs -Determination of trace elements - Determination of lead, cadmium, chromium and molybdenum by graphite furnace atomic absorption spectrometry (GFAAS) after pressure digestion》，美国食品药品监督管理局（USFDA）发布的Elemental Analysis Manual中，第4.4部分《INDUCTIVELY COUPLED PLASMA ATOMIC EMISSION SPECTROMETRIC DETERMINATION OF ELEMENTS IN FOOD USING MICROWAVE ASSISTED DIGESTION》。
我国发布的食品中铅的标准检测方法包括：GB/T 5009.12-2010 《食品中铅的测定》GB/T 20380.3-2006《淀粉及其制品 重金属含量 第3部分：电热原子吸收光谱法测定铅含量》GB/T 23870-2009 《蜂胶中铅的测定 微波消解-石墨炉原子吸收分光光度法》NY/T 1100-2006《稻米中铅、镉的测定 石墨炉原子吸收光谱法》SN/T 0447-1995《出口饮料中铅、铜、镉的测定》SN/T 0778-1999《出口大米中铜、锌、铅、镉的测定方法原子吸收分光光度法》SN/T 0851-2000《进出口肉类罐头中铅、镉的检验方法原子吸收光谱法》SN/T 2211-2008《蜂皇浆中铅和镉的测定 石墨炉原子吸收光谱法》GB/T18932.12-2002《蜂蜜中钾、钠、钙、镁、锌、铁、铜、锰、铬、铅、镉含量的测定方法 原子吸收光谱法》。
本标准方法整合了上述国内外主要标准中的前处理方法和测定方法。对广东省主要食品进行调查，测定结果表明，大多数食品铅含量范围在0.02 mg/kg ~1.27mg/kg，本方法能满足大多数食品中铅含量的检测要求，能够适用于各类普通食品以及高盐食品。
四、其他需要在网上公开说明的事项