紫外可见分光光度计(UV)

主题:【新手求助】急,急,急,柠檬烯,紫外!!!

浏览0 回复11 电梯直达
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新手上路,帮帮忙!!!帮帮忙!!!
      本人目前在弄柠檬烯,查询到柠檬烯有在252nm处有吸收峰,因为学习了气相现在气相质谱不能用。初试一下柠檬烯用紫外分光光度法测柠檬烯含量。。。
  正题来了:参考文献:Limonene encapsulation in freeze dried gellan systems .以及Limonene encapsulation in freeze-drying of gum Arabic-sucrose-gelatin systems .文献中柠檬烯溶于正己烷,在252nm处测定紫外吸光度。  但是实际实验中,我在此处扫不出峰!!!!!
                步骤如下:  正己烷基线扫描,然后将外侧参比换成柠檬烯的正己烷溶液,扫波长在252nm没有吸收.
                                  分析原因可能是浓度太小,后又尝试浓度大一些的, 还是在此处没有峰。
                                  而且在低浓度下吸光度为负值!!!查询文献应该是参比在此处有强烈的吸收。
                                  咨询同学,师兄说柠檬烯是液体,直接扫一下柠檬烯,看柠檬烯在何处出峰。。。参照呢, 一次就没有参照,空白扫,一次是用正己烷扫,都没有峰。。。
                                  晕死我了,有没有同学帮忙解答,万分感谢,下面附上我今天扫的图谱,大家帮忙一下,谢谢!!!!!

[img=,554,151]file:///C:/Users/W418/AppData/Local/Temp/ksohtml/wps840D.tmp.jpg[/img]
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推荐答案:tutm回复于2017/03/27
看了楼主参考的第一篇文献,发现这篇文章的实验有个严重的问题,测试过程错误,结果是不可信的!
不知楼主是否注意到,其中关于测试有段文字:

文章作者写了,使用正己烷为溶剂(不是环己烷,不过和你做不出来应该关系不大),但是问题是他们使用了聚苯乙烯材质(polysterene cuvettes)的比色皿来测试。
这种比色皿使用波长最低一般在350nm,波长再往下比色皿自身就会有较大的吸光度,是不能用的。作者测到252nm,这个波长下比色皿自身的吸光度已经非常大了,显然得到的结果是不可靠、不可信的。
楼主你应该用的是石英比色皿吧?那你没有错,是那两个老外做错了!别再按他们的方法试了,另辟途径吧。
不知道那份杂志有没有专业人员审稿,这样的基础性错误也没看出来,误导人啊。
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青栀
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分光光度法的原理是样品反应后的浓度不同颜色不同,透光率不同而确定浓度的,溶解以后有颜色变化吗?
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原文由 青栀(m3191408) 发表:
分光光度法的原理是样品反应后的浓度不同颜色不同,透光率不同而确定浓度的,溶解以后有颜色变化吗?
柠檬烯本身为液体,溶于正己烷,颜色从外观上几乎看不到变化,1:10(v/v)液体可能稍微有点发白,系列梯度稀释之后几乎都是澄清透明的。谢谢你
sdlzkw007
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你的问题模糊不清,我的理解是柠檬烯在哪种条件(溶剂、温度、络合物)有吸收?文献的具体说法不清楚。个人建议从分子结构入手可能的化学反应有哪些?是否能够定量反应,特异性怎么样?如果是显色反应,产物的稳定性怎么样?需要一一搞清楚,不能盲目的乱来。
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原文由 sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:
你的问题模糊不清,我的理解是柠檬烯在哪种条件(溶剂、温度、络合物)有吸收?文献的具体说法不清楚。个人建议从分子结构入手可能的化学反应有哪些?是否能够定量反应,特异性怎么样?如果是显色反应,产物的稳定性怎么样?需要一一搞清楚,不能盲目的乱来。
谢谢啦,我再查一查!
有水有渝
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你看到的文献有没有可能是错的,下面这篇文献说最大吸收在200nm,
HPLC法测定留兰香油中柠檬烯
http://wenku.baidu.com/link?url=Z-kmXbCxq1wRkF1ioHzuXaEt5_jPE59-Kwye4SX72xtTDH5HhAsQasATLNmmE9GMfBmh4f0O3t4_pvLbKwcnGCgrFu6USJsUO0vRstnvj1m

先鉴别你手上的柠檬烯是正品
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
你看到的文献有没有可能是错的,下面这篇文献说最大吸收在200nm,
HPLC法测定留兰香油中柠檬烯
http://wenku.baidu.com/link?url=Z-kmXbCxq1wRkF1ioHzuXaEt5_jPE59-Kwye4SX72xtTDH5HhAsQasATLNmmE9GMfBmh4f0O3t4_pvLbKwcnGCgrFu6USJsUO0vRstnvj1m

先鉴别你手上的柠檬烯是正品


嗯,我的柠檬烯是正品,在sigma公司买的标品,这次用的标品(取了一定量梯度稀释)做的。后来用的90%做的,就是和人家说的不一样。就算氧化也是部分,怎么在那里一点吸收峰也没有。
还是谢谢你~
哎,我现在觉得好泄气,连个这个也做不好,哎。
tutm
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看了楼主参考的第一篇文献,发现这篇文章的实验有个严重的问题,测试过程错误,结果是不可信的!
不知楼主是否注意到,其中关于测试有段文字:

文章作者写了,使用正己烷为溶剂(不是环己烷,不过和你做不出来应该关系不大),但是问题是他们使用了聚苯乙烯材质(polysterene cuvettes)的比色皿来测试。
这种比色皿使用波长最低一般在350nm,波长再往下比色皿自身就会有较大的吸光度,是不能用的。作者测到252nm,这个波长下比色皿自身的吸光度已经非常大了,显然得到的结果是不可靠、不可信的。
楼主你应该用的是石英比色皿吧?那你没有错,是那两个老外做错了!别再按他们的方法试了,另辟途径吧。
不知道那份杂志有没有专业人员审稿,这样的基础性错误也没看出来,误导人啊。
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2017/3/27 14:21:27 Last edit by tutm
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原文由 tutm(tutm) 发表:
看了楼主参考的第一篇文献,发现这篇文章的实验有个严重的问题,测试过程错误,结果是不可信的!
不知楼主是否注意到,其中关于测试有段文字:

文章作者写了,使用正己烷为溶剂(不是环己烷,不过和你做不出来应该关系不大),但是问题是他们使用了聚苯乙烯材质(polysterene cuvettes)的比色皿来测试。
这种比色皿使用波长最低一般在350nm,波长再往下比色皿自身就会有较大的吸光度,是不能用的。作者测到252nm,这个波长下比色皿自身的吸光度已经非常大了,显然得到的结果是不可靠、不可信的。
楼主你应该用的是石英比色皿吧?那你没有错,是那两个老外做错了!别再按他们的方法试了,另辟途径吧。
不知道那份杂志有没有专业人员审稿,这样的基础性错误也没看出来,误导人啊。
谢谢您啦,本来不抱希望的来看一下我的帖子,您不知道我有多惊喜,这几天我在努力补充文献,因为怕准备不足(作为一个要开始做实验的新手),太盲目,也在尝试测定,老觉得怎么回事啊,我的操作一次比一次谨慎,第二篇外文文章发的还是food chemistry,应该权威性挺高的,我究竟哪出错了呢。

对,我的浓度高,超限了,在那吸光度值还是0.

让我说说我现在的心情吧:本来不报希望的看看我的帖子(因为发帖已经很多天了),可能也是习惯了吧,每天来溜溜,点开一看有提醒,很惊讶,没想到您把那篇文献给看了,我觉得好难得,好激动~谢谢您拉了我一把,让我觉得世间好有温情,你们的帮助真的对我来说很重要,很重要。(激动,有点语无伦次)

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2017/3/27 23:10:51 Last edit by p3197415
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tutm
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原文由 p3197415(p3197415) 发表:
谢谢您啦,本来不抱希望的来看一下我的帖子,您不知道我有多惊喜,这几天我在努力补充文献,因为怕准备不足(作为一个要开始做实验的新手),太盲目,也在尝试测定,老觉得怎么回事啊,我的操作一次比一次谨慎,第二篇外文文章发的还是food chemistry,应该权威性挺高的,我究竟哪出错了呢。

对,我的浓度高,超限了,在那吸光度值还是0.

让我说说我现在的心情吧:本来不报希望的看看我的帖子(因为发帖已经很多天了),可能也是习惯了吧,每天来溜溜,点开一看有提醒,很惊讶,没想到您把那篇文献给看了,我觉得好难得,好激动~谢谢您拉了我一把,让我觉得世间好有温情,你们的帮助真的对我来说很重要,很重要。(激动,有点语无伦次)


没关系,不客气
各种问题有时对看的人也会有用的,这也是获得间接经验很好的途径。
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