主题:【资料】还在为大肠菌群酶底物检测试剂烦恼么?

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小编为你解忧,采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。
【工作原理】
加入含有总大肠菌群细菌的水样,放入程控定量封口机中,目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养,总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色;同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG,产生特征性荧光。同样原理,耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养基呈现黄色。
程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:
智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪(耐热)大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。
·        通过9900Z  sealer PLUS程控定量封口机自动将样品/试剂混合液分配到独立孔中。
·        培养结束后,阳性孔数可以转化为 MPN 值。
·        51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。
·        97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。
·        整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。
【使用方法】
定性测试:
第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解,36℃培养24h;
第二步、结果判读
        无色=阴性
        黄色=总大肠菌群阳性
        黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性
注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色为阳性
定量检测
第一步、在100ml水样中加入试剂,溶解;
第二步、倒入51孔定量检测盘(定量孔板)或97孔定量检测盘(定量孔板)中;
第三步、用程控定量封口机对定量检测盘(定量孔板)进行封装,36
℃培养24h;
第四步、51孔定量检测盘(定量孔板)结果判读:
        无色=阴性
      黄色格子=总大肠菌群阳性
黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性
查对照MPN表计数
注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数。
97孔定量检测盘(定量孔板)结果判读
无色=阴性
      黄色格子=总大肠菌群阳性
黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性
查对照MPN表计数
注:耐热大肠群菌(粪大肠菌群)需44.5℃培养24h后,观察黄色格子为阳性结果,查对照MPN表计数
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原文由 郭景祎(guojingyi-2010) 发表:
内容比较详细,可以参考
谢谢郭老师 多多指教
丢翻小脚盆
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