主题:【求助】您打算购买光散射仪器吗?

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lisyzheng
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越来越多的科学家认识到:用多角度光散射仪表征聚合物和生物高聚物(以及粒子)无需作任何假设就可确定其绝对分子量、分子尺寸和构象的唯一方法。

三十多年前,Wyatt技术公司(WTC)的科学家发明了最早商业化的用激光作光源的光散射仪器。从那以后,我公司一直致力于激光光散射硬件、软件、服务和支持系统的开发和完善。

这本手册简要介绍了光散射原理,可以作为指导,帮助您在购买仪器时作出正确的选择。

在这本手册中,我们阐述了光散射的基本原理。另一方面,对那些已经熟悉光散射技术的人来说,也将会从中找到丰富的实用信息,帮助他们在选购仪器时做出正确的选择。如果您是刚接触这一领域,我们希望这本手册能帮助您理解这一新技术;如果您已经熟悉光散射技术,这本手册也将给您提供丰富的实用信息,总之我们希望能使多角度光散射仪成为您实验室分析的一个常规仪器。
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lisyzheng
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在人们的日常生活中,进入人眼的光线中其实只有极少的一小部分是从其光源直接进入人眼的。我们看见的大多数光线,是从光源(如太阳、灯泡、计算机显示器,激光源等)发出后经过散射才到达人眼的。蓝色的天空,您现在阅读的手册,充满房间的烟雾等都是散射的例子。事实上,正是通过那些被散射了的光线我们才得以看见周围几乎所有的可见物品。

我们鉴定和区别物体是通过推断它们所散射光线的差异和数量来进行的。这些推断并不只局限在肉眼能看得见的物体上。对于非常小的物体,比如粒子和分子,其许多物理性质也可通过测量它们所散射的光线来推断。

通常,定量检测溶液散射光的基本方法通常是先用激光器产生的高度平行和单色化的光束照射样品,然后用检测器检测在不同散射角的散射光强。

检测的角度可以局限在某一个固定的角度,也可以做异步检测一系列散射角。一些早期的光散射仪器是将可转动光电倍增管(PMT)作为检测器,有滤光镜的水银弧光灯作为光源。

  世界上第一台可用的光散射装置是由Bruno Zimm(现任WTC科学顾问委员会委员)于四十年代发明,而最成功的早期商业化设备则是于五六十年代美国生产的Brice-Phoenix和德国生产的SOFICA。

  1971年,Dr. Philip Wyatt和Dr. David Phillips制造了了世界上最早的商业化激光光散射仪器-Differential Ⅰ。第二年,Beckman 仪器公司设计了一种小角激光光散射仪(LALLAS)。此后,该技术进一步被Chromati和随后的LDC/Milton-Roy所改进和商业推广。

  70年代末期,Wyatt认识到同步测定一系列散射角的必要性,其产品DLS800就是这种多角度装置的首次开发应用。到1984年Wyatt技术公司正式成立后,Dr. Wyatt指导开发了第一台商业化的同步多角度光散射仪,商品名为DAWNR。

现在,多角度激光光散射仪已经成为化学家和生化学家必不可少的研究工具,因为多角度激光光散射仪可用来直接测定溶液中物质的分子量和分子尺寸,无需依靠参考校正或对样品作物理假设。

Wyatt技术公司(WTC)自1982年3月由Philip .Wyat博士创立起,一直致力于多角度激光光散射仪及其相关产品的的研究、开发与生产。如今WTC的产品遍及全球50多个国家和地区,其用户中包括众多的世界知名的大学,研究机构,跨国公司。所以在WTC的文献库中有上千篇用Wyatt光散射发表的论文,这是其它光散射公司无法企及的。

WTC在多角度激光光散射领域拥有世界上最好的研发、生产和应用队伍,并且在光散射领域的两位世界级的科学家:Edward A. Adelberg博士和Bruno H. Zimm博士作为Wyatt技术公司的指导科学家,

lisyzheng
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静态和动态光散射,各自测量样品的不同物性。

静态光散射(又称经典或总强度光散射),检测散射光强度及其散射角(检测器和入射光线夹角)的依赖性。散射光强度由检测器和入射光线夹角的函数来测定。静态光散射测量时一般在百分之几或十分之几秒后光强可达到平衡,静态光散射可得到分子的摩尔质量(分子量)、均方根旋转半径、分子构象和分子间相互作用的信息。检测的是发生在大约0.1秒级的光强平均值

动态光散射(又叫准弹性光散射[QELS],或光子自相关光谱[PCS]),测量的是发生在微秒或毫秒级的光强涨落波动,这些涨落是由分子扩散常数直接引起的,与分子的流体力学半径有关。

(希望有人捧场,那我会接着把这篇有用的文章贴上来的!)
lisyzheng
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静态光散射得到的分子量和分子尺寸
    多角度激光光散射仪能够测定聚合物和(蛋白质等)生物高聚物的绝对分子量,分子量范围从1000g/mol(道尔顿)到几亿道尔顿。此外,多角度光散射仪是直接测定样品分子量,无论样品的结构如何,都无需对其作任何结构上的假设(及假设它们是棒状、无规线团或是球形)。因此,多角度光散射仪是HPLC(高效液相色谱仪)理想的附加检测器,可检测数均、重均和Z均分子量。用您现有的设备,加上一个多角度光散射检测器,就无需进行色谱柱标定和对照参考标准的工作。
分子尺寸会影响散射光强的角度发生变化。如果光散射仪只测定单一的角度,就无法确定散射光强的角度依赖性。因此,只有多角度光散射仪能用于直接测定分子尺寸。结构紧密的小分子(<10nm),散射光强没有或有很小的角度变化。而对于分子量超过50,000g/mol的无规线团分子(符合“rule of thumb”;没有确切的截止点,当然也有许多例外),通常可以检测到散射光角度的变化。通过所检测角度的数目,多角度光散射仪可以确定分子的均方根旋转半径(rms),从8-10nm到大于1微米均可!由于均方旋转半径是从角度变化的斜率确定的,因此最少需要检测三个角度。
多角度光散射仪其它的优点还包括可直接测定支化性能,因为支化度的计算计算依赖于分子均方旋转半径的测量。此外,多角度光散射仪还可用于检测紫外和折光指数检测器所完全遗漏的蛋白质聚集体,以及研究同种和异种结合的蛋白质和其它生物高分子。
lisyzheng
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动态光散射得到的流体力学半径
    动态光散射能检测分子在溶液中的扩散系数。球形颗粒的扩散系数直接与其半径有关,所以相等的半径(即所谓的“流体力学半径”)可与测定的不同分子的扩散系数相对应。假设分子是球形的,则这种相同的半径就叫作分子的流体力学半径。动态光散射可以测定从1nm到大于1微米的分子流体力学半径。20多年前,Wyatt技术公司就已经开发了静态光散射仪,它可与不同厂家的动态光散射检测器相结合,使科学家能同步地利用这两种值得赞美的技术。现在,Wyatt技术公司已经制造了自己的动态光散射仪,即WyattQELSTM。
    WyattQELSTM仪器包含一个光子计数雪崩式光电二极管,一根多模式的光学纤维,它连接在DAWN或miniDAWN的读取头上,和一个实时数字相关器,用来测量光学纤维携带信号强度的自相关函数。通过自相关函数,ASTRA软件计算出扩散系数进而得到流体力学半径。
  WyattQELS 仪器可以将样品进行单机或在线模式处理。在单机处理模式中,未分离的样品将形成复杂的相关函数,其偏差从纯指数衰减出发,在外分散的异组分处上升。用户可从多组分布假设中选择一组,软件也在这一基础上获得一个尺寸分布曲线。
    在流动模式下(结合色谱分离),仪器可同步收集动态和经典光散射数据,从而计算得到每一切片的分子量、均方旋转半径和流体力学半径。第7页的插图可说明对于色谱法中给定的切片,ASTRA软件如何得到WyattQELS的流体力学半径。
    将动态光散射得到的流体力学半径和静态光散射得到的均方根旋转半径的数据结合起来,就可获得分子的构象信息,这是其它任何方法很难或无法得到的。
 
高行云
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能否用于注射液类药品的可见异物检查(澄明度检查),即检查50um以上可见微粒,准确计数,每ml中含有多少50um以上的粒子。
lisyzheng
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abtme
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回答:能否用于注射液类药品的可见异物检查(澄明度检查),即检查50um以上可见微粒,准确计数,每ml中含有多少50um以上的粒子

美国PSS(PARTICLE SIZING SYSTEMS)激光粒度仪公司
AccuSizer 780颗粒计数器
单粒子光学传感 (SPOS) 技术,配合大功率的He-Ne红色激光、高速脉冲计数器和多通道数字式信号处理器,提供超高分辨率和精确度的分析,使检测结果真正成为真实的粒径分布,且重现性极佳。

1.粒度范围:0.5 -- 400 um, 1.0 -- 400 um, 3.0 -- 1000 um, 5.0 -- 2500 um
2.测量时间:30 sec - 1 min
3.数据通道:8-512个通道

可以满足您的需要

buffer
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可见微粒对光散射来说太大了吧,估计会损害仪器
我们用光散射一般测几十到几百nm的粒子
原文由 abtme 发表:
回答:能否用于注射液类药品的可见异物检查(澄明度检查),即检查50um以上可见微粒,准确计数,每ml中含有多少50um以上的粒子

美国PSS(PARTICLE SIZING SYSTEMS)激光粒度仪公司
AccuSizer 780颗粒计数器
单粒子光学传感 (SPOS) 技术,配合大功率的He-Ne红色激光、高速脉冲计数器和多通道数字式信号处理器,提供超高分辨率和精确度的分析,使检测结果真正成为真实的粒径分布,且重现性极佳。

1.粒度范围:0.5 -- 400 um, 1.0 -- 400 um, 3.0 -- 1000 um, 5.0 -- 2500 um
2.测量时间:30 sec - 1 min
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lisyzheng
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静态光散射测的是绝对分子量,动态光散射是测粒径的一种方法。
leochaung
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我所在单位是研究细菌性多糖的,一般分子量在几十万到几百万左右。目前希望用多角度激光光散射仪检测样品的分子量,希望各位老师能推荐几款合适的仪器。
另外,我想问一下,是不是与多角度激光光散射仪联用的视差检测仪需要专门匹配,还是普通的视差检测仪也可以配用?
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