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液相色谱（LC）

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主题：【求助】氰基柱的使用维护教程

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农村户口_1201

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发表于：2018/11/03 21:04:03 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

公司最近上马一个新项目，需要用到正相氰基柱，第一次使用，以前全是反相C18系统好多东西都不会，求大神给点相关资料。

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2018/11/4 7:12:42 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我这边在用的时候，没有什么特别注意的。维护和C18差不多

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农村户口_1201

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2018/11/4 7:16:28 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 www(cxm2009) 发表:我这边在用的时候，没有什么特别注意的。维护和C18差不多

我们这边用正己烷过渡，封柱用异丙醇，没什么问题吧？

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dadgoh

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2018/11/4 8:41:46 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

从反相到正相可用异丙醇过度。

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senke

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2018/11/4 11:20:53 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

CN液相色谱柱(氰基柱/腈基柱)
　 CN(氰基)填料由于其具有中等极性的氰基键合固定相，其既可用于正相色谱，又可用于反相色谱。其在用于正相色谱时，可使用如正己烷的低极性流动相，在用于反相色谱时，可使用甲醇或水的强极性流动相。

CN的疏水性在反相色谱固定相中相对较低，并且由于具有π-电子作用腈基，其与ODS相比显示出不同的选择性。YMC-Pack CN适用于在ODS上分离时间太长的组分的分离，以及在ODS上最优化色谱非常困难的场合。

极性最强的反相柱
　在所有反相色谱柱中，极性最强。在疏水性十分强的化合物用标准的C18和C8柱和典型的反相洗脱液不能洗脱时，可用氰基柱。此外氰基柱提供了与C18，C8，和C4苯基等反相柱不同的选择性。大孔径300?也可用于分析生物分子。
可替代硅胶
　在正相色谱中氰基键合相可以替代硅胶。键合正相柱有快速平衡和比非衍生硅胶表面活性更一致的特点。为延长柱的寿命，交替调换正相反相的洗脱剂是应该避免的。正相和反相都可以用，但在采用不同的分离模式时，洗脱的次序不同。
CN液相色谱柱(氰基柱/腈基柱)的特点
　在正相和反相中都能有应用
稳定的高覆盖率的单键合相，充分封端球型
较低的疏水性，由于氰基的存在，具有独特的选择性
从分析柱到制备柱的孔径有120?和300?供选择
粒径 3, 5, 10, 15和20?m
孔径 12nm(120?)和30nm(300?)
碳含量 120?：10%和300?：4%
pH范围 2.0 ~ 7.5

辛基键合相 120? 300 ?
平均孔径 135?15 ? 300?40 ?
平均比表面积(m2/g) 300?40 200?30
孔体积(mL/g) 1.0?0.10 0.90?0.15

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senke

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2018/11/4 11:22:05 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

CN基柱作反相色谱，操作和维护和C18柱完全相同。CN柱用于反相条件时，CN键会水解，尤其是在pH1.5-7.0范围以外，在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快，如果在这个条件下使用，需要清洗一下，也需要用10倍柱体积溶液冲洗，如下： 95%水/5%乙腈、 THF四氢呋喃、 95%乙腈/5%水并保持95%乙腈/5%水继续冲洗，以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗。在pH1.5-7.0条件时，也比较伤柱子，使用完以后要注意冲洗，可以参照上述方法，时间不需要那么长，可适当减少。柱子使用一定时间后，柱效下降，老化，也可如正相时清洗一下柱子恢复柱性能，清洗时用10倍柱体积的下列溶液冲洗： 95%水/5%乙腈 THF四氢呋喃 95%乙腈/5%水再走流动相即可。

CN柱用于正相使用时没什么问题，当柱子使用一定时间后，柱效下降，柱子老化，可清洗一下恢复柱性能。清洗时用10倍柱体积的下列溶液冲洗：氯仿、异丙醇、二氯甲烷再走流动相即可。

如果在pH 2.0-5.0条件时用流动相平衡一下即可，这是最理想的pH范围。

CN柱子不使用时，可用异丙醇或正己烷保存，两端封好。流动相改变时要注意过渡，比如缓冲盐过渡到有机相时需要先用水冲洗再走有机相。

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