色谱柱是如何填装的?
目前大多数实验室是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。
液相色谱柱、特别是高效
液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。
在有关色谱基本理论的讨论中可以得知,发生在色谱柱中总的谱带展宽效应与流动相的线速度、粒径以及溶质在流动相中的扩散系数、溶质在固定相中的扩散系数等密切相关。对于给定粒径的填料来说,能否填充成均匀而紧密的柱床,是得到高性能柱子的关键,而采用粒径细且分布均匀的优质填料,则是得到高性能柱子的最基本保证。
高压匀浆法装填将填料悬浮在适宜的匀浆液中制成匀浆,在其尚未沉降之前,很快以高压泵将其以很高 的流速压进柱中,便可制备出填充均匀的柱子。这是常见的分析和制备色谱柱的装填方法。常用的“标准”HPLC柱为φ4.6mm×250mm,其内腔体积约为4.2mL,约需3.5g填料。
有关分析色谱柱的思考
我认为自己装填色谱柱是有风险的,商品化色谱柱的装填是熟练技术工人千锤百炼的结果有自己独特和专用的装填设备,塞板的选择和放置都是非常精确地。如果装填技术不过关,在高压作用下,填料透过塞板,进入检测器是非常危险的,还有可能损坏检测器。所以尽可能的选择商品化的色谱柱本身是有质量保证的!
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