土壤、鱼肉、植物样品中DDT和六六六农药的测定
1.样品的制备
一、土壤样品:将土壤样品中的树根、石块等杂质除去后,风干后磨碎过40目筛子(0.45mm)。
二、鱼肉样品:将鱼中的骨骼和鱼皮除去,将肉切成小块用冷冻干燥法去水后用研磨粉末。(或者先用组织捣碎机捣碎后再进行干燥)。
三、植物样品:主要包括大米、玉米、植物叶、茎和根。样品风干后用组织捣碎机磨碎后过10~20目筛。
2.提取
用索氏提取:称取10g左右样品和约2g无水硫酸钠混合后置于滤纸筒中,然后分别加入200ng的2,4,5,6-四氯间二甲苯和十氯联苯作为指示物。用150mL正己烷/丙酮混合溶液(体积比为1)提取12小时。提取结束后将提取液用旋转蒸发浓缩为30mL左右(水浴温度40℃,旋转速度不能太快,若有暴沸现象可以加入适量的沸石;旋转蒸发过程需要加入正己烷以除去丙酮。)
若使用超声波提取,可以先将样品用提取液浸泡过夜,然后用分步提取方式进行提取。
3.净化
磺化法净化:将上述的浓缩液转移至分液漏斗中,然后加入3mL的MOS级别浓硫酸,进行磺化,直至硫酸层无色。若在上述过程中,需要进行多次磺化,则每次加入浓硫酸的体积为提取液的10%左右。若在浓缩液中有丙酮存在,则磺化时溶液会变为黑色。磺化结束后,用20%的硫酸钠水溶液洗涤有机相至中性。然后将有机相用无水硫酸钠除水。将有机相用氮气吹扫进行浓缩(氮气应该为柔和,使得液面稍有振动,可以在45℃水浴中进行氮吹浓缩)。浓缩至1mL后,可以用GC-ECD进行分析。
上述样品中,鱼肉、大米和玉米可以不用磺化,用弗罗里硅土柱净化也可。
取层析柱(ф0.8cm×30cm)(预先用丙酮和正己烷淋洗,风干)干法装柱:自下而上依次装入少量的玻璃纤维(用丙酮和正己烷和混合液抽提)、1cm无水硫酸钠、5g降活后的佛罗里硅土和1cm无水硫酸钠,敲实。用20mL的正己烷淋洗,待顶层的硫酸钠即将要接触空气时,加入2mL左右的滤液,用100mL6%的乙醚正己烷混合液淋洗,淋洗液接至具尾茄形瓶中,用旋转浓缩至小体积,再用柔和的氮气吹至1mL。(佛罗里硅土,在650℃条件下烘3小时,冷却至常温加入2%的水降活2小时备用;无水硫酸钠,在450℃条件下烘4小时,冷却至常温,贮于干燥器中备用;乙醚,在30℃条件下加入适量无水硫酸亚铁重蒸。)
4. 测定
气相色谱仪条件(供参考):进样口温度260℃,无分流进样,进样量1μL。压力10psi,总流量7mL/min.,柱流量1.0mL/min.。吹扫流量3mL/min.,柱箱温度:程序升温,初始温度100℃保持2 min.,以5℃/min的速率升至200℃,不保持,以1℃/min.的速率升至290℃,保持10min.,再以20℃/min.的速率升至300℃;检测器温度320℃,尾吹流量40mL/min.(在分析有机氯农药之前,先用p,p'-DDT测分解率)。DM-5毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)。
注:上述的柱箱温度是在有十氯联苯替代物的条件下设定的,如果没有加入替代物,可以将升温程序变为更短。
由于p,p'-DDT可能会在
气相色谱的进样口分解为p,p'-DDE和p,p'-DDD,因此在用气谱分析有机氯农药时,应先测定p,p'-DDT分解率(本实验每测定12个样品后分别用p,p'-DDT测定一次)。参照美国EPA8081B方法,当两者中任何物质的分解率大于15%时,应该对气谱进样口(包括内衬管和进样垫)进行清洗或者硅烷化,并将毛细管柱连接进样口的一端截去一段。分解率的计算公式如下: