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对于面前这个庞然大物(不是体积而是价格),我是十分的害怕(主要是对我来说太贵了,轻易不敢对他出手),但又很想征服他,看着他这身板,对于小白来说真的是无从下手呀,那也别着急,我们先不对他下手,我们来摸摸他的底细,常言道“知己知彼,才能百战不殆”!看看他这好几个盒子都是干什么用的。
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要想能操作他,我们得先知道他是通过什么原理来工作的,
液相色谱的工作原理呢我相信就算你没怎么接触过检测,只要学过分析化学的人呢多多少少会知道一点(为啥是多多少少呢,就看大学的你上课找没找周公下过棋了)。我们将处理好的样品溶液经进样器进入流动相,随着流动相进入色谱柱,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式输出检测结果。工作原理搞清楚了,接下来我们看看它的组成。
它呢有五个最基本的组成部分,第一个是输液系统(输液泵),第二个是进样系统,第三个色谱柱,第四个检测系统,第五数据记录和处理系统(电脑工作站)。接下来我们来一一揭开它们神秘的面纱。就是这样式的(上面全是英文,对于英文不好的我第一步先查这机器上面每一个单词的意思):
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输液系统中最主要的核心呢就是输液泵,
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我面前的这个家伙采用的是双柱塞往复式串联泵,绿色圈圈那个就是了,它是由两个结构相同的泵头串联而成,因为
凸轮的凸点差180°,所以两根柱塞杆的运动一直都是相反的,两个泵头一个连接单向阀(简称1号泵),且连接单向阀的泵头储液腔体积是没有连接单向阀泵头(简称2号泵)的一倍,当整个机器开始运行时,1号泵泵出的液体一半进入色谱系统,一半在2号泵中储存起来,当1号泵再去吸液时,2号泵里的液体进入色谱系统,这样往返的循环,使得色谱系统内的流动相脉动减小,流量平稳。在它傍边呢还有一个排气阀,就是红色圈圈那个,它主要是为了排出管路中的气泡,以免出现压力和流量不稳。
进样系统是由手动进样阀和进样针组成。手动进样阀长这个样子:
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它的背面呢有六个连接点如下图所示:
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1号和4号连接定量环,2号连接输液泵,3号口连接我们的色谱柱,5号是放空管,6号是废液管。当进样阀手柄位处于进样(Load)位置时,样品从进样针注入进样孔后进入进定量环,定量环充满后,多余样品从放空孔排出。我们把手柄转动至进样(Inject)位置时,阀与
液相流路接通,由泵输送的流动相冲洗定量环,带动样品进入色谱柱中。(借鉴了网上的图片)
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接下来是我们的色谱柱,一般情况下他都在柱温箱里,今天我可是看到他的真实面貌了。就这么细细的一根,放在这里好像有点不美观呢,所以我们依然很贴心的给他配备了柱温箱:
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还有我们的检测器,是SPD-10A紫外检测器
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它的工作原理是基于光的吸收定律-朗伯比尔定律。此检测器配备的是氘灯(查了很久才知道D灯代表氘灯),波长在190-600nm。它是由氘灯发出的光,通过一系列的光路组件后形成单一波长的平行光束,当光束透过流动池时,若
流动相不
吸收光,则样液
吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。
最后呢就是我们的工作站啦,准备一个单独的电脑,在电脑上安装上我们的N2000色谱数据站,万幸的是工作站是中文的,我们可以轻松操作。
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好了,
液相色谱的组成部分以及原理我们读学习完了,下面我们就要把他们连接起来(这抽象的画风,真令人尴尬,凑活看吧),投入实使用啦,具体如何连接以及操作,我们下一篇见!