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主题：【已应助】请帮忙分析HPLC如何分离此两个物质

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sunka5724
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发表于：2019/11/23 20:40:25 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两个未知化合物，走液相半制备的，分析柱呈现未基线分离两个峰，做了35%乙腈等度，32-35%乙腈水梯度，甲醇梯度，色谱图都如此，分析都未达到较好分离，所以不敢再做制备分离，请大家帮忙应当进一步怎么做呢？因为要做制备分离，最好不要引入其他物质，谢谢
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2019/11/23 20:40:50 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
根据分离度的计算公式，想要增大分离度1、降低进样量，使峰变得窄些。进样量大，峰宽还容易拖尾。2、降低洗脱强度、你的流动相洗脱能力太强，两个峰一下都被洗出来了。
再者，我觉得你两个峰分的差不多了，分离效果还不好，可以换等强度的不同溶剂组成试试，例如把乙腈-水换为四氢呋喃-水。
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