主题:【已应助】色谱图重现不出来

浏览0 回复1 电梯直达
kite503
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在戴安P680上做的,我的目标峰出峰时间在30和82分钟,现在我要重复一下我的实验,却怎么也做不出来原来的色谱效果,并且出峰时间变成了10和50,什么都是一样的,最开始怀疑是样品的原因,结果重新制样还是不行,后来怀疑是流动相,再新开一瓶色谱纯甲醇还是这样,最后我换到戴安U-3000上做,结果目标峰出峰时间为8和40,说明不是仪器的原因,比例阀应该没问题,也结了废液一分钟又一毫升。
    样品的因素也排除了,流动相也排除了,仪器也排除了,所有的都是用同一根色谱柱,同样的预柱,同样的梯度,2011年12月21号做的始终重复不出来,求高手指点?难道是柱子的原因,我理论塔板数针对80分钟的峰还有一万多,可能性应该不大。哎。。。。。。。。。。
  另外柱温,流速等色谱条件都没变柱子使用中也冲过2个多小时。流动相是甲醇和0.1%的磷酸,0.1%磷酸每天使用前新配!
是不是柱子不行了,这些目标峰原来的理论塔板数都是2,3万,现在都是2,3千了?
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