主题:【已应助】高效液相色谱求助

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xxm0612
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我最近在做高效液相制备色谱,用反相柱,甲醇-水为洗脱剂,有几个问题不太明白,请大家帮忙看看。
1.样品在甲醇中的溶解性不好,可以用其他的试剂溶解么?(在氯仿中溶解行好)
2.图中两个峰挨得很近,增加水的量可以把它们分开,为什么?
3.图中明显是一个峰,为什么在3D图中显示的是重合的两个峰(即同一个位置上下两个圈)?
4.进样量加大时,峰型发生改变,甚至原本分开的峰连在了一起,为什么?
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xxm0612
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甲醇不行,就换乙腈试试,一般液相的有机相我们就用这两种,很少用其他的有机溶剂溶解。两个峰挨得近流动相水多加能分开,说明延迟了各自的出峰时间,并且后者的出峰时间延迟的多点,所以原来不是很分开的峰分开了。液相出峰只能表明这个峰有一种及多种溶解性相似的物质存在,并不是一个峰就对应一个物质,一个峰可以有多个物质,换合适的条件在理论上是能分开的。进样量增大时,这个峰整个的出峰时间(宽度)就会增加,原来挨的近的峰自然会沾到一起,而且增大进样量峰型也会变丑,会出现平顶山或拖尾的现象。
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