主题:【已应助】高效液相色谱仪检测蛋白纯度的样品含量应为该蛋白定量限的多少倍

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haishinihao
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比如蛋白定量限为1μg/ml,那么要检测该蛋白的纯度时,它的蛋白含量在多少以上才有说服力,是定量限的多少倍来着,记不清楚了。
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junxi2008
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一般在1mg/ml比较合适,尽量上样量为10-20μg,建议是20μg,你可以参照药典,看看药典的生物药品总上样量是多少。一般在化药上是定量限的100倍左右。但没有硬性规定,举个例子,某种片剂含药量很少,再做溶出是,溶出液含药量就更少了,所以在分析时,采用500μl进样检测。锋面积大概是定量限的20倍左右,峰面积虽然不高但是审评专家也不会说什么,毕竟进样量已经是极限了。
如果你蛋白浓度(或含药量)不是很低,尽量上样量在20μg及以上最好,要是上样量故意弄得太低,人家就会怀疑你有其他杂质峰没被检出。
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