原文由 userwuq 发表:
效果挺好!赞一个。
物镜 20x Pinhole值0.27Airy, 不知道激光强度和gain以及offset值大概取多少?红、蓝控制的如何?
噪声控制的可以,不知道实体图有没有经过图像处理(过滤、guass模糊,傅立叶转换之类的)
下面是我用50X物镜, Pinhole值1.60Airy,切片20层做的,激光强度50%,gain值100, offset值0.1
附带二维和三维轮廓分析
注:图片分辨率较大(1024*1024),需放大看。
原文由 leicafans 发表:
原先认为激光强度和gain以及offset值不同样品反射率不同, 写出来意义不大, Gain应该在200~300左右, Offset为0. Zeiss的红蓝控制在Leica表示为蓝绿, 在图中有反映.实体图是Topo的实体, 未想到直接显示3D, 未经其它处理,如经图像处理的话就不能反映粗糙度了? 以后有机会在上图, 可惜金属材料的样品没有, 这只是样品的框架.
如果Pinhole为1.6Airy的话是否层面太厚了, 按通常50X物镜NA约0.8左右, 如果1.6Airy的话层面解析可能都要有1um左右啦.
原文由 userwuq 发表:
我以前pinhole值一直设在0.3左右,但是红蓝调节时蓝色的残留老是去不掉,所以你看我的offset总是调到最大0.1。这个是不是我的设备参数没有调好?
另外我发现在比较小的pinhole下,如果我想得到比较高的亮度,只能跳激光强度和gain值,但是很容易出现红色,如果我调到红色基本上没有的时候,切片的图像大部分都很暗。昨天我试着在50X物镜下调整激光强度,gain值以及offset到基本上没有红、蓝出现,然后调大pinhole值,这样整个切片亮度就上来了,而且不会出现红色。
原文由 userwuq 发表:
按道理是这样的,但是一直有一个问题,我举个例子:
以滑痕为例,假如整个划痕波峰到波谷的扫描深度为10微米,我做切片时,应该在5微米中间处进行红蓝调节(why),当我调好红蓝时移到波峰处,会显示很多红色(即过亮),而移到波谷处是会显示很多蓝色(为过暗)。所以当我尽量将波峰处的红色调没时,波谷处已经暗的不行了。
这个让我很头疼。