主题:【已应助】液相色谱峰型

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液相色谱出峰,拖尾因子在0.95-1.05范围内,但峰型矮胖,峰宽达到2.5左右,减小进样体积至5ul,有所改善,也换过流动相,换了两次色谱柱,峰宽还是很宽,可以再从哪些方面改善?
最佳答案:viki回复于2021/02/25
改善拖尾因子从这几个方向进行方法优化:
(1)提高柱温
(2)流动相:采用高盐、离子对试剂,或者增加扫尾剂如三乙胺;查下待检化合物的PKa值,一般建议流动相的pH和化合物的PKa值至少差2;
(3)色谱柱:色谱柱采用端基封尾技术的色谱柱
(4)有机相:试试更换下流动相有机相类型
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xiaogumd11
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峰型矮胖,有可能柱子效下降了,可以用甲醇多冲洗一段时间看看看。再把流速提高,出峰时间提前,可以改善峰形
viki
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改善拖尾因子从这几个方向进行方法优化:
(1)提高柱温
(2)流动相:采用高盐、离子对试剂,或者增加扫尾剂如三乙胺;查下待检化合物的PKa值,一般建议流动相的pH和化合物的PKa值至少差2;
(3)色谱柱:色谱柱采用端基封尾技术的色谱柱
(4)有机相:试试更换下流动相有机相类型
安平
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      详细说说具体的分析条件为好,最好有谱图。
dadgoh
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hujiangtao
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原文由 DW(p3319032) 发表:方法中检测器的采集频率设的是不是偏小
也怀疑过时这个问题,用的waters的UPLC,采集频率是20点/秒,对常规的液相来说这个频率就可以,就没有考察…
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原文由 viki(Insm_df8bf4f4) 发表:改善拖尾因子从这几个方向进行方法优化:(1)提高柱温(2)流动相:采用高盐、离子对试剂,或者增加扫尾剂如三乙胺;查下待检化合物的PKa值,一般建议流动相的pH和化合物的PKa值至少差2;(3)色谱柱:色谱柱采用端基封尾技术的色谱柱(4)有机相:试试更换下流动相有机相类型
查到的信息是这个物质对流动相ph的变化不敏感,因此流动相的ph没有作为重点考察;柱温目前用的60℃,和国外标准一致;这个物质存在异构体转换,查到的文献几乎都用到乙腈去达到平衡,所以更多的在尝试不同色谱柱,及流动相。这个物质的分子量800多,有点怀疑是物质本身的问题…
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原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:可加长柱长或减小填料粒径试试。
该组织保留很强,尽量用的短柱子,粒径试过3.5um,3um,没有很大改善
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通过溶剂效应改变了稀释剂组成,也没有大的改善