主题:【已应助】液相色谱峰拖尾

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Insm_3f1c6429
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药典方法检测胰岛素含量,流动相是0.2mol/L硫酸盐溶液和乙腈适当比例,柱温40度,流速1.0ml/min,样品浓度0.7mg/ml,色谱柱YMC~C18,新柱子也拖尾,应该怎么解决呢,,C4的柱子拖尾因子就是合格的,不管哪个厂家的C18色谱柱都拖尾
推荐答案:Insm_af467669回复于2022/02/11
拖尾原因可能有:1,色谱柱过载,可选择增大色谱柱内径;使用高容量的固定相;改进样品预处理;2,可能是杂质的干扰峰,调节流动相的组成;    使用测试样品混合物检查色谱柱:使用色谱纯溶剂,使用流动相改性剂(如三乙胺);3,硅胶表面未完全键合的硅羟基的影响,提高缓冲溶液或盐溶液的浓度(离子对色谱),降低流动相的pH值:使用碱性去活的色谱柱;4,色谱柱的滤网堵塞    更换滤网,使用柱前过滤系统将样品过滤,5,柱外效应的影响产生了死体积,检查毛细管连接;6,色谱柱有“塌陷”、短流或断流,更换色谱柱,使用性质较温和的分离条件
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C4柱子拖尾因子合格,可以使用C4柱子检测,为啥一定要用C18柱,从图上看,是严重拖尾,可以提高乙腈的比例试试
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