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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】液相开机后是用进样的初始流动相比例平衡至少30min吗？

浏览0 回复8 电梯直达
Ins_3ec84f82
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发表于：2022/03/23 17:59:41 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验室师姐告诉我得100％有机相和90％有机相各冲洗30min后再以初始比例平衡约10min，这时基线平稳了，再开始进样。但我又咨询过我的老师，他说液相开机后直接初始浓度平衡至基线平稳就好了，但我之前试过，平衡好基线大约10min就够了。??这样的话，我是应该怎么做才正确呢？
推荐答案：有yami回复于2022/03/24
你师兄师姐的方法对色谱柱和仪器都比较友好，你在实验室时间充足的情况下也可以这样做。如果时间比较赶其实初始比例直接冲也可以。前者属于学校实验室比较爱护仪器的方法，后者是工作后本着时间就是金钱的原则的办法。
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wuyuzegang
dahua1981
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2022/3/24 9:44:02 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
初始浓度平衡至基线平稳就好，有的仪器平衡快有的慢，关键还是看基线平稳，时间只是个参考
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有yami
Ins_e2da403f
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2022/3/24 12:58:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你师兄师姐的方法对色谱柱和仪器都比较友好，你在实验室时间充足的情况下也可以这样做。如果时间比较赶其实初始比例直接冲也可以。前者属于学校实验室比较爱护仪器的方法，后者是工作后本着时间就是金钱的原则的办法。
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Methonal
v3249317
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2022/3/24 13:49:54 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼上两位老师已经说的很好了，时间和耗材足够的情况下，你师姐的方式是真的很不错。要是你要着急回去，但还没平衡，你可以在序列里面排一两针空白用来平衡色谱柱，既不耽误你回，也不耽误平衡色谱柱。
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myoldid
v2963297
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2022/3/24 14:46:17 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这两种说法都仅限于反相且只有有机相和水的条件，如果流动相中含有缓冲盐，两种方法都不可行，有缓冲盐时，均需要用不含缓冲盐的流动相先做平衡替换。


如果流动相只是有机相和水，且上一次使用后，柱子没有缓冲盐，那就直接上你的初始流动相，柱子没那么脆弱的。如果是用缓冲盐，用完后一定要记得用高比例的水冲洗柱子，不然下一次没注意用高比例的有机相的话，可能导致盐析出，损坏柱子。

另外单独只是有机和水，平衡柱子10min也可以了，除了查看基线，还要关注压力曲线。
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2022/3/24 14:47:33 Last edit by v2963297
安平
byron1111
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2022/3/24 17:01:47 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
具体情况具体分析为好。


什么流动相？什么柱子？什么样品，结果都不一样。

以常用的ods为例，如果流动相不含添加剂，并且流动相接近色谱系统停机时的保存溶液，那么平衡时间比较短。


如果差异较大，流动相含添加剂，那么平衡时间长
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Ins_3ec84f82
Ins_3ec84f82
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2022/3/26 9:41:40 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我的流动相是乙腈水，无缓冲盐的。感谢各位大佬的解答! ! !
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dadgoh
dadgoh
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2022/3/27 9:44:12 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
师姐说的平衡方法比较适合不同样品且不使用缓冲盐的液相测试情况。老师说的方法适合每天单一样品测试时的情况。
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安平
byron1111
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2022/3/28 10:10:19 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
      无缓冲盐，一般平衡时间比较短。

        但是到底需要多久的平衡，以实际的进样为准，只要能够获得满意的重复性，那么平衡时间就足够了。
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