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液相色谱（LC）

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仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

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主题：【已应助】液相开机后是用进样的初始流动相比例平衡至少30min吗？

浏览0 回复8 电梯直达

Ins_3ec84f82

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发表于：2022/03/23 17:59:41 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

实验室师姐告诉我得100％有机相和90％有机相各冲洗30min后再以初始比例平衡约10min，这时基线平稳了，再开始进样。但我又咨询过我的老师，他说液相开机后直接初始浓度平衡至基线平稳就好了，但我之前试过，平衡好基线大约10min就够了。??这样的话，我是应该怎么做才正确呢？

推荐答案：有yami回复于2022/03/24

你师兄师姐的方法对色谱柱和仪器都比较友好，你在实验室时间充足的情况下也可以这样做。如果时间比较赶其实初始比例直接冲也可以。前者属于学校实验室比较爱护仪器的方法，后者是工作后本着时间就是金钱的原则的办法。

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2022/3/24 9:44:02 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

初始浓度平衡至基线平稳就好，有的仪器平衡快有的慢，关键还是看基线平稳，时间只是个参考

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有yami

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2022/3/24 12:58:22 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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Methonal

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2022/3/24 13:49:54 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼上两位老师已经说的很好了，时间和耗材足够的情况下，你师姐的方式是真的很不错。要是你要着急回去，但还没平衡，你可以在序列里面排一两针空白用来平衡色谱柱，既不耽误你回，也不耽误平衡色谱柱。

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myoldid

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2022/3/24 14:46:17 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这两种说法都仅限于反相且只有有机相和水的条件，如果流动相中含有缓冲盐，两种方法都不可行，有缓冲盐时，均需要用不含缓冲盐的流动相先做平衡替换。

如果流动相只是有机相和水，且上一次使用后，柱子没有缓冲盐，那就直接上你的初始流动相，柱子没那么脆弱的。如果是用缓冲盐，用完后一定要记得用高比例的水冲洗柱子，不然下一次没注意用高比例的有机相的话，可能导致盐析出，损坏柱子。

另外单独只是有机和水，平衡柱子10min也可以了，除了查看基线，还要关注压力曲线。

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2022/3/24 14:47:33 Last edit by v2963297