主题：【已应助】总氮曲线和空白

1、试剂的配制

　　碱性bai过硫酸钾du的配制过程十分重zhi要，掌握不好，会影响消解dao效果，对测定结果产生一定的影响。（GB11894—89）中关于碱性过硫酸钾的配制，只是简单的说将过硫酸钾和氢氧化钠溶于水中，并未作其它要求。实际上，过硫酸钾的溶解速度非常慢，若要加快溶解，绝对不能盲目加热，即使加热，也最好采用水浴加热法，且水浴温度一定要低于60℃，否则过硫酸钾会分解失效。配制该溶液时，可分别称取过硫酸钾和氢氧化钠，两者分开配制，再混合定容，或者先配制氢氧化钠溶液，待其温度降到室温后再加入过硫酸钾溶解。若二者在一只烧杯中溶于水，应缓慢加水，同时搅拌，防止氢氧化钠放热使溶液温度过高引起局部过硫酸钾失效。

　　2、玻璃器皿的洗涤

　　所使用的玻璃器皿应先用（1+9）盐酸浸泡后，再用无氨水冲洗数次才

　　能使用，否则，也会造成空白值偏高或平行性较差的情况。

　　3、消解温度、压力的控制

　　使用医用手提蒸气灭菌器的实验室，因测定压力为1.1~1.4kg/cm2，温度为120℃~124℃，消解时，（GB11894—89）中要求达到规定温度压力后即开始计时，而我的一般经验是，直接打开放气阀加热一段时间，待蒸气灭菌器内的冷空气被彻底赶尽、放出热蒸气后再关闭放气阀消解，并且将消解温度控制在123℃，这样测定结果最为理想。

　　4、比色时的注意事项

　　该项目的测定涉及两个波长（220nm和275nm），建议在测定完一组样品的同一波长后，再调整到另一波长，统一测定，不要测完一个样品的两个吸光度后再换另一个样品，这样反复调整波长会引起一定的测量误差。

　　5、试剂的选择

　　碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮的过程中，过硫酸钾是至关重要的试剂。首先，试剂的纯度关系到空白值的高低、测定结果的准确度。一般普通分析纯过硫酸钾的总氮含量最高不超过0.005%，但由于试剂质量存在差异，有些厂家、批次的试剂含氮量常常达不到这个要求，致使空白值偏高。因此，有条件的话建议使用优级纯试剂，尽量降低试剂中的含氮量，从而降低实验空白值。

可以参一下文献和这篇原创
https://bbs.instrument.com.cn/topic/4305698

建议楼主把标曲发出来看一下，空白数值具体是多少，还有A220和A275处吸光值；个人建议先查找空白的原因，器皿和消解环境原因楼主查找了排除，纯水、环境条件、试剂等排查建议流程如下：
1、实验用水：换娃哈哈或者怡宝消解加同批次试剂看空白是否小于0.030；
2、环境条件：有可能有氨的干扰，和总硬度、挥发酚等使用氨水的房间分开；
3、试剂：盐酸基本可以排除，主要验证氢氧化钠和过硫酸钾，分批次配制做正交试验即可，即新的氢氧化钠加之前的过硫酸钾，新的过硫酸钾加之前的氢氧化钠，都是新批次的试剂分开验证。
楼主如果空白原因查找出来了用硝酸盐氮的标准溶液不加氢氧化钠和过硫酸钾并且不消解就可以绘制标曲，总氮斜率（质量μg对吸光值）经验值在0.01左右，查找下操作原因即可

盐酸也有可能有影响的，之前实验过加新配盐酸1 9空白就合格，用久置的盐酸空白就会大于0.030

原文由 ztyzb(zxz19900120) 发表:建议楼主把标曲发出来看一下，空白数值具体是多少，还有A220和A275处吸光值；个人建议先查找空白的原因，器皿和消解环境原因楼主查找了排除，纯水、环境条件、试剂等排查建议流程如下：1、实验用水：换娃哈哈或者怡宝消解加同批次试剂看空白是否小于0.030；2、环境条件：有可能有氨的干扰，和总硬度、挥发酚等使用氨水的房间分开；3、试剂：盐酸基本可以排除，主要验证氢氧化钠和过硫酸钾，分批次配制做正交试验即可，即新的氢氧化钠加之前的过硫酸钾，新的过硫酸钾加之前的氢氧化钠，都是新批次的试剂分开验证。楼主如果空白原因查找出来了用硝酸盐氮的标准溶液不加氢氧化钠和过硫酸钾并且不消解就可以绘制标曲，总氮斜率（质量μg对吸光值）经验值在0.01左右，查找下操作原因即可

用娃哈哈做过空白，吸光度和我们用制水机制出来的水，差别不大0.084和0.092。过硫酸钾和氢氧化钠都是新开封的，新配置的。实验室内还在做氨氮，其他的没有做。

原文由 Garfie1d(Ins_4ffbe1bf) 发表:盐酸也有可能有影响的，之前实验过加新配盐酸1 9空白就合格，用久置的盐酸空白就会大于0.030

盐酸用的分析纯的，今天我在重新配置一份，试一试

原文由 123(m3149125) 发表:1、试剂的配制　　碱性bai过硫酸钾du的配制过程十分重zhi要，掌握不好，会影响消解dao效果，对测定结果产生一定的影响。（GB11894—89）中关于碱性过硫酸钾的配制，只是简单的说将过硫酸钾和氢氧化钠溶于水中，并未作其它要求。实际上，过硫酸钾的溶解速度非常慢，若要加快溶解，绝对不能盲目加热，即使加热，也最好采用水浴加热法，且水浴温度一定要低于60℃，否则过硫酸钾会分解失效。配制该溶液时，可分别称取过硫酸钾和氢氧化钠，两者分开配制，再混合定容，或者先配制氢氧化钠溶液，待其温度降到室温后再加入过硫酸钾溶解。若二者在一只烧杯中溶于水，应缓慢加水，同时搅拌，防止氢氧化钠放热使溶液温度过高引起局部过硫酸钾失效。　　2、玻璃器皿的洗涤　　所使用的玻璃器皿应先用（1+9）盐酸浸泡后，再用无氨水冲洗数次才　　能使用，否则，也会造成空白值偏高或平行性较差的情况。　　3、消解温度、压力的控制　　使用医用手提蒸气灭菌器的实验室，因测定压力为1.1~1.4kg/cm2，温度为120℃~124℃，消解时，（GB11894—89）中要求达到规定温度压力后即开始计时，而我的一般经验是，直接打开放气阀加热一段时间，待蒸气灭菌器内的冷空气被彻底赶尽、放出热蒸气后再关闭放气阀消解，并且将消解温度控制在123℃，这样测定结果最为理想。　　4、比色时的注意事项　　该项目的测定涉及两个波长（220nm和275nm），建议在测定完一组样品的同一波长后，再调整到另一波长，统一测定，不要测完一个样品的两个吸光度后再换另一个样品，这样反复调整波长会引起一定的测量误差。　　5、试剂的选择　　碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮的过程中，过硫酸钾是至关重要的试剂。首先，试剂的纯度关系到空白值的高低、测定结果的准确度。一般普通分析纯过硫酸钾的总氮含量最高不超过0.005%，但由于试剂质量存在差异，有些厂家、批次的试剂含氮量常常达不到这个要求，致使空白值偏高。因此，有条件的话建议使用优级纯试剂，尽量降低试剂中的含氮量，从而降低实验空白值。

过硫酸钾是在50度水浴中溶解的，配置过程是严格按照国标要求配置的，实验中所有用到的玻璃器皿，我都在硫酸中浸泡了48小时，硫酸浓度忘记了，比1+9要浓，消解条件是124°，40分钟。过硫酸钾用的优耐德和默克的，氮含量＜0.0005%

默克和优耐德的过硫酸钾新开封的话不会有啥问题（除非供应商没良心故意给你质量差的然后装在默克和优耐德的瓶子里面），氢氧化钠我不清楚你是用的分析纯还是优级纯，要用优级纯的，盐酸的话影响不会有多大。
消解过程一般来说是不会对空白造成多大影响，除非是高压锅确实太脏。我们也都是灭菌和消解TPTN用的一个高压锅，没出过啥问题。
还是从比色管，移液管和纯水中找问题吧。还有一点，你在消解的时候盖子是直接盖上用纱布缠好的吗。因为我有遇见过实验人员做TN会在盖盖子的时候在瓶口塞一张小滤纸，他们给我说的是怕冷却后过硫酸钾结晶在盖子周围而导致打不开盖子。看似有点道理，其实这可能会是带入污染的一个点。不知道楼主是不是这样做的。

数据乱七八糟的话可以先检查下比色皿是不是石英材质的，不要用错了比色皿

原文由 秋梨膏(Insm_6ec608fd) 发表:默克和优耐德的过硫酸钾新开封的话不会有啥问题（除非供应商没良心故意给你质量差的然后装在默克和优耐德的瓶子里面），氢氧化钠我不清楚你是用的分析纯还是优级纯，要用优级纯的，盐酸的话影响不会有多大。消解过程一般来说是不会对空白造成多大影响，除非是高压锅确实太脏。我们也都是灭菌和消解TPTN用的一个高压锅，没出过啥问题。还是从比色管，移液管和纯水中找问题吧。还有一点，你在消解的时候盖子是直接盖上用纱布缠好的吗。因为我有遇见过实验人员做TN会在盖盖子的时候在瓶口塞一张小滤纸，他们给我说的是怕冷却后过硫酸钾结晶在盖子周围而导致打不开盖子。看似有点道理，其实这可能会是带入污染的一个点。不知道楼主是不是这样做的。

氢氧化钠用的是优级纯的，比色管是用硫酸泡了48小时以上的，水的话，用的娃哈哈，密封的话，用的是纱布直接包住，用线缠住。今天又测了一次空白1.9。啊。。。。