完全培养基配置：过滤 55 mL Gibco 胎牛血清，加入到 500 mL1640 培养基中，加入 5 mL 抗青霉素链霉素，7.5 mL HEPES 溶液，用于 H69、H82、H526 细胞的培养；过滤 50 mL Gibco 胎牛血清，加入到 500 mL 的 L15 培养基中，加入 5 mL 抗青霉素链霉素，7.5 mL HEPES 溶液，用于 SW1271 细胞的培养，充分混匀放置 4℃保存。

%4. 10%APS：称取 0.1 g 过硫酸铵溶于 1 mL ddH₂O 中，放置 4℃ 保存。

%4. 5×Tris-Glycine Buffer 电泳缓冲液：称取 15.1 g Tris，94 g 甘氨酸，5 g SDS，用ddH₂O 定容至 1 L，充分搅拌溶解，室温保存。

%4. 转膜缓冲液：称取 Tris 15.14 g，甘氨酸 72.16 g，用 ddH₂O 定容至 1 L，充分搅拌溶解，室温保存。然后每次使用时取 200mL 转膜液和甲醇 200 mL，用 ddH₂O 定容至 1 L 充分混匀。

%4. 10% SDS：称取 10 g SDS，ddH2O 定容至 100 mL，68℃ 加热溶解，调整 pH 至7.2，室温保存。

%4. 5% 脱脂牛奶封闭缓冲液：称取 1 g 脱脂奶粉溶于 20 mL TBST Buffer 充分溶解，4℃保存。

%4. TBST Buffer：8.8 g NaCl 和 1M Tris-HCl (pH 8.8) 20 mL，溶解于 1000 mL ddH₂O中，加入 0.5 mL Tween 20 混匀，4℃ 保存。

细胞培养及传代

%4. 细胞复苏：从液氮中取出细胞后，将细胞冻存管用细胞复苏盒迅速转移至 37℃ 恒温水浴锅中，轻摇使细胞迅速解冻。细胞解冻后立即吸取至 10 mL 的完全培养基中，吹打混匀，900 rpm 离心 8min。吸弃上清，用 5 mL 完全培养基重悬细胞，将细胞接种至 25 cm2 培养瓶中，恒温 37℃，5% CO2 条件下培养。

%4. 细胞传代：贴壁细胞吸弃培养基后用 5 mL 1×PBS 清洗 2 次，吸弃上清，每 25cm2 培养瓶或 6 cm 培养皿加入 1 mL 胰酶消化 2 min。镜下观察细胞开始脱落，加入 2mL 完全培养基终止消化，移入 15 mL 离心管内，900 rpm，离心 8 min。悬浮细胞直接移入 15 mL 离心管内，900 rpm，离心 8 min。吸弃上清液，加入新鲜培养基重悬细胞并吹打混匀。将细胞按实验需求接种于培养瓶或培养皿中，培养条件同上。