新手第一次做氨基酸检测,经验不足,谱图中出现鼓包(红圈部分),不知是什么原因,还请各位老师指导
岛津HPLC测定17种游离氨基酸
色谱条件:C18色谱柱
流动相:A相:20mM NaH2PO4与20mM Na2HPO4
B相:ACN:CH3OH:H2O = 45:40:15
柱温:40℃
流速:1.0mL/min
波长:254nm
梯度洗脱见表
时间(Min) | %A | %B |
0 | 95 | 5 |
10 | 91 | 9 |
20 | 89 | 11 |
21 | 70 | 21 |
34 | 77 | 23 |
35 | 75 | 25 |
43 | 68 | 32 |
44 | 20 | 80 |
49 | 10 | 90 |
50 | 95 | 5 |
53 | 95 | 5 |
衍生操作:0.5mL硼酸妍缓冲液+0.1mL提取液,涡旋振荡20S,+0.1mL邻苯二甲醛(OPA)衍生液,涡旋振荡20S。
仪器谱图:
查了各种文献,谱图中都没有鼓包,不知出现鼓包是什么原因呢?