【前言】联苯胺（4,4-二氨基联苯），是二元弱碱，其化学性质与苯胺相似。联苯胺曾是染料合成的重要中间体，用它可以合成上百种染料，但是他的毒性很强，2017年被世界卫生组织列为1类致癌物。

【关键词】联苯胺；液相色谱法

1.方法原理

样品通过阳离子交换固相萃取柱，联苯胺被吸附，用乙酸溶液将联苯胺锁定在固相萃取柱上，用甲醇淋洗除去杂质，再用氨水甲醇溶液进行洗脱，洗脱液浓缩定容后，用具有荧光检测器的高效液相色谱分离检测，根据保留时间定性，外标法定量。

2、主要仪器设备

高效液相色谱仪

固相萃取仪

旋转蒸发仪

3、试剂和材料

乙腈，色谱纯

甲醇，色谱纯

氨水，优级纯

硫代硫酸钠，分析纯

乙酸，分析纯

氨水，优级纯

乙酸铵，色谱纯

甲醇中联苯胺，1000μg/ml

4、样品

4.1样品采集

采样前，向样品瓶中加入硫代硫酸钠，每500ml样品加入50mg。采样时，使样品充满采样瓶，不留液上空间。采集的样品在4℃以下冷藏、避光保存。

4.2试样制备

4.2.1固相萃取柱的活化

将固相萃取柱固定在固相萃取装置上，先用5ml甲醇以约2ml/min的流速通过固相萃取柱，在填料暴露于空气之前，向柱子上加入5ml水，待水剩约2ml时，停止活化。

4.2.2富集、净化与浓缩

量取150ml样品置于250ml锥形瓶中，以约2ml/min的流速通过活化后的固相萃取柱，样品完全富集后，加入5ml乙酸溶液（3%，V/V），待乙酸溶液完全流出后，加入8ml甲醇淋洗，待甲醇完全流出后，继续用真空泵抽吸5min。用7ml氨水甲醇溶液（5+95）洗脱，洗脱液收集到浓缩瓶中。然后将浓缩瓶置于氮吹仪上，在60℃浓缩至1ml，再用水定容至2.0ml，混匀后经滤膜过滤到棕色样品瓶中，待测。

4.2.3空白试样的制备

用实验用水代替样品，按照与试样的制备相同步骤进行空白试样的制备。

5、分析步骤

5.1仪器条件

流动相A：乙腈，流动相B：乙酸铵溶液（0.01mol/L），洗脱程序为等度洗脱，流动相A/流动相B=20/80（V/V），流速：1.0ml/min，柱箱温度：40℃；进样量：40μl，荧光检测器的激发波长/检测波长：292nm/395nm；进样体积40μL。

5.2标准溶液配置校准曲线

用微量注射器分别移取适量联苯胺标准液，用甲醇水溶液逐级稀释，制备标准系列，质量浓度分别为2.00μg/L、5.00μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、200μg/L。按照5.1仪器条件，由低浓度到高浓度依次对标准系列溶液进样，以联苯胺的质量浓度（μg/L）为横坐标，以其对应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

5.3试样测定

按照5.1仪器条件进行试样的测定。

5.4空白试验

按照5.1仪器条件进行空白试样的测定。

6、结果计算与表示

样品中联苯胺的质量浓度ρ（μg/L）按照下面公式进行计算。

式中：ρ——样品中联苯胺的质量浓度，μg/L；

ρ₁——由标准曲线得到的试样中联苯胺的质量浓度，μg/L；

V₁——试样定容体积，ml。

V——取样体积，ml；

D——稀释倍数。

7、某印染厂废水检测结果

某印染厂废水按照上述步骤采集、同一水样分成3份进行前处理、上机分析，经计算，结果如下：

联苯胺	第一份（μg/L）	第二份（μg/L）	第三份（μg/L）	平均值（μg/L）	相对标准偏差RSD（%）
联苯胺	0.020	0.028	0.017	0.022	25.8