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鲜玉米青贮干样淀粉的测定

图1

测定淀粉的主要方法有酶水解法、酸水解法、旋光法，但在牧场中，最常用酶水解法来测定鲜玉米青贮干样（见图1）中的淀粉。

1、 原理

样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成小分子糖，再用盐酸将小分子糖水解成单糖，最后按还原糖测定。

2、 测定步骤

2.1称取粉碎好的鲜玉米青贮2-5g，置于放有折叠滤纸的漏斗内。先用50mL 60-90℃的石油醚分5次洗去脂肪，再用150mL 85%无水乙醇洗去可溶性糖类，滤干乙醇，将残留物移入250mL烧杯内，并用50mL水冲洗滤纸，洗液一并倒入烧杯内（见图2），将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷到60℃以下，加20mL淀粉酶溶液，在55-60℃水浴1h，并不断搅拌。然后取1滴此液加1滴碘化钾溶液，若不显蓝色可进行下一步；若显蓝色，再加热糊化并加入20mL淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸，冷却后移入200mL容量瓶中，并加水至刻度（见图3），混匀、过滤、弃去初滤液。取50mL滤液，置于200mL锥形瓶中，如5mL盐酸5ml盐酸(1+1)，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后用pH计，用氢氧化钠溶液(200g/L)、盐酸溶液调至中性，溶液转入100mL容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。

图2

图3

2.2吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml碱性酒石酸铜乙液置于150ml锥形瓶中，加水10ml,加入玻璃珠2粒，从滴定管中滴加比预测体积少1ml的样品溶液至锥形瓶中，使在2min内加热至沸，趁沸以每2s1滴的速度滴定，直至蓝色刚好退去为终点，记录消耗样液体积。同法平行操作三份，得出平均消耗体积。

同时，量取50ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液。

3、 计算结果

式中：[img]" style="max-width: 100%;max-height: 100%;[/img]——试样中淀粉的含量，g/100g

      [img]" style="max-width: 100%;max-height: 100%;[/img]——测定用试样中葡萄糖的质量，mg

      [img]" style="max-width: 100%;max-height: 100%;[/img]——空白中葡萄糖的质量，mg

      [img]" style="max-width: 100%;max-height: 100%;[/img]——以葡萄糖计换算成淀粉的换算系数

      [img]" style="max-width: 100%;max-height: 100%;[/img]——称取试样的质量，g

      [img]" style="max-width: 100%;max-height: 100%;[/img]——测定用试样处理的体积，mL