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液相色谱（LC）

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主题：【求助】色谱柱的再生

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jiasheng

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发表于：2024/06/09 08:54:20 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

求教各位老师，关于Agilent Bio WAX, NP5, PK guard 5μm, 4.6×50mm 这个柱子如何再生呢？

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2024/6/9 15:43:36 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

平衡柱子：使用适当的溶剂（通常是水或缓冲液）来平衡柱子，确保柱子内的所有组分都是均一的。使用强溶剂：通过使用比样品更难洗脱的溶剂来冲洗柱子，以去除柱子上吸附的强保留物质。逐步降低溶剂强度：在完成强溶剂冲洗后，逐步降低溶剂的强度，以帮助柱子恢复到初始状态。重新平衡：最后，再次使用初始流动相平衡柱子，以确保其准备好进行下一次分析。

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2024/6/9 16:01:17 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱随着使用时间的延长，其柱子效果会下降，即使通过再生，也无法完全恢复，到了一定时间依然会柱子失效，毕竟柱子本身就是消耗品。楼主可以参考一下下列再生方法：
离子交换柱的再生方法：
1.酸洗法：主要用于阴离子交换柱的再生。将酸洗液（如1M HCl水溶液）通入柱内，静置一定时间（一般为30分钟），然后用大量纯水冲洗去除酸性残留，并充分平衡至约pH7左右。其目的是通过酸性条件下为正电离子提供H 离子，使得正电离子与树脂中的阴离子轻松交换，达到离子交换柱再生的目的。
2.碱洗法：主要用于阳离子交换柱的再生。将碱洗液（如1M NaOH水溶液）通入柱内，静置一定时间，然后用大量纯水冲洗去除碱性残留，并充分平衡至约pH7左右。其目的是通过碱性条件下为负电离子提供OH-离子，使得负电离子与树脂中的阳离子轻松交换，达到离子交换柱再生的目的。
3.盐洗法：主要用于蛋白质层析柱的再生。将高盐浓度的盐水溶液通入柱内，静置一定时间，达到离子交换柱再生的目的。盐洗法适用于蛋白质纯化过程中出现的阻塞和污染等问题，通过增加盐浓度，清除蛋白质的污染和降解产物，提高离子交换柱的纯化效果和分离效率。

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