主题:【分享】【“仪”起享奥运】DNA条形码技术在中药鉴定中的应用

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DNA条形码(DNA Barcoding)技术是指选用一段标准的短DNA片段自动化地对物种进行快速、准确地鉴定与识别的技术。Paul Hebert首次提出DNA条形码的概念,并将该技术引进到生物物种的鉴定中。DNA条形码技术在近些年来被广泛应用于生物物种分类与鉴定中,已发展成为物种鉴定相关研究方面的热点,具有广阔的应用前景。中药鉴定是研究中药品种、质量,制定中药标准,寻找和扩大药源的前提和基础,传统的中药鉴定主要是根据药材的形态特征进行性状鉴定,要求鉴定人具有足够丰富的分类学知识和鉴别经验,且中药大多为植物的某个部位,有时鉴别特征不明显或不存在,容易造成混淆。

DNA条形码技术在中药鉴定中的应用与发展为中药基原的准确鉴定提供了技术支撑,弥补和克服了传统中药鉴定方法中的一些缺陷和难题[20]。用于物种鉴定的理想的DNA条形码序列,其种内遗传距离应该明显小于种间遗传距离,且存在明显的种间差异,形成间隔区,可用来区分不同物种及判断种内不同个体之间的变异程度。利用标准的、有足够变异的、易扩增且相对较短的DNA片段对中药材物种进行DNA条形码鉴定,具有鉴定结果准确、重复性良好、方法通用性强等优点。DNA条形码技术已经在中药材的物种鉴定中得到广泛应用,同时由国家药典委员会编纂的《中华人民共和国药典》2020年版四部中收载了9107中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则。

在近年来的中药物种鉴定中,DNA条形码技术逐步成为了研究的重点,在中药材鉴定、药品流通、监督等诸多方面都取得了很好的应用成果。已有研究证明,快速发展的DNA条形码技术是区分中药材及其相近品种的有力工具。通常中药材由于保存不当、时间过长、加工炮制等原因,会导致长DNA片段(>200bp)的提取和扩增成功率非常低[22]。Chen SL等对超过6600份植物样本进行了ITS2(Internal Transcribed Spacer 2)序列鉴别能力的测试,这些植物样本在植物分类学中分布广泛,结果显示ITS2在种的水平上的鉴别成功率达92.7%。ITS2区域具有可用于设计通用引物的保守1336区域,易于扩增,具有足够的变异用以区分亲缘物种。基于以上特征,ITS2区域可作为中药材鉴定的潜在标准DNA条形码序列。
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