移液枪是实验室中常用的精确测量和转移液体的工具，正确使用移液枪不仅关系到实验结果的准确性，还关系到实验人员实验的工作效率。因此，掌握移液枪的正确使用方法和注意事项至关重要。从现在起一起学习一下移液器。

一、最优的量程范围

大多数移液器的正常操作体积范围是指示量程的(10-100)%。尽管这一范围是可操作范围，但随着体积设定的下降性能参数将会发生变化。100uL移液器的准确性参数在指示量程的50-100%的时为±0.8%。然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%)，不准确度将会提高3倍，或者为(2.5-3)%。所以获得最佳性能的最优量程范围是指示量程的35-100%。尽量避免将一个移液器的体积设定少于最大体积的10%，而应该用小量程的移液器来进行小体积移液操作。

二、吸头浸入深度

正确的吸头浸入深度可以提高准确性高达5%，尤其对微量移液器相当重要。对于微量移液器，吸头应该浸入(1-2)mm，而对于大量程的移液器，浸入深度应为(6-10)mm。如果吸头浸入的太深，吸头内部的空气就会被压缩，造成过多的液体被吸入。残留在吸头表面的液体也可能会影响结果。吸头如果浸入的不够充分，那么可能会吸入空气，就会造成气泡的形成和移取体积不准。

三、正确的吸液角度

1.吸液时吸头尽可能以90度角浸入到样品中，最好不要偏离垂直位置超过20°对于微量体积的移液器，以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的准确性。偏离垂直超过20°吸液将会导致不准确的量取-过多的液体将会被吸入，造成移液不准确。以60度角浸入，将会使你的液体吸取量超过所设定的0.7%。

2.保持一致性保持一致的移液节奏和速度将会帮助你得到理想的、重复性更高的结果。保持节奏和速度的一致性可以将准确性提高5%，保持一致的样品分配、一致的样品排液。

3.注意区分润洗吸头和不适合润洗的情况，润洗吸头2-3次可以在吸头内形成同质膜，这样可以提高0.2%的准确度性。润洗可以中和微量移液中的毛细效应，对于大体积移液，这可以使吸头内部温度与样品温度一致。当移取热的和冷的溶液时润洗会对结果产生不利影响，如从冰浴中移液或者溶液温度超过37摄氏度，润洗可能会造成高达5%的错误率。

四、避免温度变化及具体操作步骤

1.恒定的室温:移液和校准的理想温度是21.5℃士1℃。避免在有风或者有阳光直射，温度变化较大的区域操作，这些区域可能会降低移液的精准度。保证足够的平衡时间:除非另有其他要求，否则请保证足够的时间来使您的液体样品和移液器达到平衡温度。手温效应长时间使用移液器，来自手的热量可能会加热移液器一导致移液器内部的空气受热膨胀从而会产生不准确的结果。

2.移液枪标准使用步骤如下

五、移液器移液时注意事项

1.容量调整：从大体积调为小体积，逆时针旋转调节旋钮至所需量程即可；从小体积调为大体积，先顺时针旋转调节旋钮至超过所需量程的刻度，再回调至设定量程。操作时应保持移液器水平。

2.润洗吸液嘴：将移液器保持竖直状态，吸液嘴插入液面下适当深度，先吸放几次液体以润洗吸液嘴，放出的液体应该弃去。

3.正向移液法：吸液时，用大拇指将按钮按下至第一停点，将吸液嘴竖直插入液面下适当深度，慢慢放松按钮使之复位，吸取液体。等待 1s～2 s后，将吸液嘴移出液面，保持竖直状态，如吸液嘴外部有挂液，可用滤纸吸干（不可触碰流液口）。放液时，将移液器插入接收容器，吸液嘴靠壁，将按钮平稳按至第一停止点，排出液体，稍停片刻后再把按钮全部按下，排尽吸液嘴内的溶液，然后将吸液嘴沿容器内壁向上滑出，松开按钮。

4.反向移液法：一般用于移取高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体等。吸液时，先将按钮全部按下，慢慢松开按钮，用滤纸擦干吸液嘴外部。放液时，将移液器插入接收容器，将按钮按至第一停止点排出液体，继续保持按住按钮位于第一停止点至液体不再流出，然后将吸液嘴沿容器内壁向上滑出，松开按钮，弃去有残留液体的吸液嘴。

六、移液枪的校准方法

1.准备超纯水、万分之一天平(如果校正 0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之的天平)、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，防止水分挥发。

2.按移液器总量程的 100%、50%、10%分别进行第三和第四步。

3.吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复 10次。

4.将测量的数据用 ISO8655 中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。

5.根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。

6.重复 3、4 步，直至偏差在标准ISO 8655 的要求内为止。

七、移液枪维护和保养

1.如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。

2.最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或60%的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。

3.高温消毒之前，要确保移液器能适应高温。

4.校准是可以在20-25度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行使用时要检查是否有漏液现象。称量时吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降。