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主题：【分享】液相色谱标准曲线怎么做

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发表于：2024/10/19 14:51:27 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标准曲线绘制步骤：
  • ?准备标准样品?：首先，使用欲测组分的标准样品，配制成不同浓度的标准系列。这些标准样品应在与待测组分相同的色谱条件下进行配制。
  • ?绘制标准曲线?：在相同的色谱条件下，等体积准确进样，测量各峰的峰面积或峰高。用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线。理想的标准曲线应是通过原点的直线，如果标准曲线不通过原点，则说明存在系统误差。
  • ?测定空白对照?：在仪器推荐的浓度范围内，制备含待测元素的对照品溶液至少3份，浓度依次递增，并分别加入各品种项下制备供试品溶液的相应试剂。同时以相应试剂制备空白对照溶液。将仪器按规定启动后，依次测定空白对照溶液和各浓度对照品溶液的吸光度，记录读数。
  • ?线性关系考察?：液相色谱的线性关系应满足R2 > 0.999，以确保浓度与峰面积的相关性。如果线性关系不满足，则说明仪器测量有一个浓度范围，超过这个范围，线性关系就不存在了。


液相色谱标准曲线的注意事项

  • ?系统误差?：如果标准曲线不通过原点，说明存在系统误差，需要检查仪器或方法是否存在问题。
  • ?空白对照?：在构建标准曲线时，即使空白或0管有响应值，也应认为该响应值就是0浓度，即在计算时应扣除这个空白的响应值。
  • ?线性检验?：标准曲线的拟合应通过线性检验和失拟检验，确保拟合的曲线符合统计学上的参数最少原则。如果线性检验合格（P<0.05）且失拟检验合格（p>0.05），则可以采用线性模型。
  • ?仪器条件?：上机条件（如柱温、流速、流动相等）的准确与稳定是确保线性关系的重要因素。标准曲线是独立测定的，不与样品的提取条件有关，但它是衡量样品浓度的标准。
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