主题:【分享】反相色谱柱的分离原理

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分离原理?

??反相色谱柱的分离原理主要基于?相似相溶原理和?疏溶剂理论?。反相色谱柱以键合非极性基团的载体为填充剂,常见的填充剂有?十八烷基硅烷键合硅胶、?辛基硅烷键合硅胶和?苯基键合硅胶等。其分离原理是依据溶质疏水性的不同,产生的溶质在流动相与固定相之间分配系数的差异而分离。适用于大多数有机化合物、生物大分子和小分子。

疏溶剂理论

疏溶剂理论用于解释反相色谱中保留值和选择性变化的规律。反相色谱中,溶质分子由非极性部分与极性官能团组成。非极性部分与极性溶剂接触时会产生排斥力,导致自由能增加,熵减少。这种排斥力会引起溶质非极性部分的取向,造成流动相中出现容纳分子的“空腔”。疏水或疏溶剂效应使得非极性组分分子从水中被“挤”出来,与固定相上的疏水烷基之间产生缔合作用,而极性部分受到极性流动相的作用,减少保留值。流动相中有机相比例越大,物质在色谱柱上的保留时间越短,反之则越长。
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