主题:【求助】梯度如何解决气泡问题

浏览0 回复18 电梯直达
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zhzhan
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非常感谢以上前辈的指导,我先按你们说的方法试试,有什么问题再来向你们请教
colindrj
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别老怀疑气泡,是不是流动相质量问题,做梯度对流动相要求很高的
zhzhan
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原文由 colindrj 发表:
别老怀疑气泡,是不是流动相质量问题,做梯度对流动相要求很高的


应该不是流动相问题,因为同样的流动相做等度时都很好,但是做梯度时是有机溶剂和水比例达到30~40%时就会出现问题,我怀疑是不是仪器的问题,我现在也向仪器供应商反映了这个情况。

另外我箱问问高压梯度是否也一定要装在线脱气,如要装,该在线脱气是混合前脱气还是混合后???
zhzhan
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原文由 wzl-x 发表:
梯度混合肯定就有气泡的,不可以避免
好的方法是在末端出口的地方加一个反压装置,让气泡能够顺利的流出来而且不在检测池里边放大\缩小 .
这个反压装置是怎么一回事???
zhzhan
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原文由 lxdongzi2003 发表:
原文由 zhzhan 发表:
在用梯度洗脱法测西洋参含量时出现气泡,因我是刚刚接触梯度法,特向各位老师请教,有没有去除气泡的方法。
西洋参的流动相和梯度设置如下:
乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B
时间(分钟)            流动相A(%)                流动相B(%) 0~25                    19→20                      81→80       
25~60                    20→40                      80→60
60~90                    40→55                      60→45
90~100                  55→60                      45→40   

把你的流动相A改为19%的乙腈/0.1%磷酸溶液,而B为81%的乙腈/0.1%磷酸溶液,重新计算梯度表。
做样品之前用100%的乙腈把你的AB管路冲洗干净(可以连接检测器监视),再换你的流动相,接色谱柱。
试过该方法了,现在不出现频率比较快的波动峰,而是出现一个历时很长的峰高很大的不规则峰。同时用甲醇和水做梯度,反而出现了频率较快的波动峰,我现在都在怀疑是不是机器的问题,是否是混合器有问题,基本都是在有机溶剂达到30~40%就开始出现问题了
wangpu1979
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原文由 zhzhan 发表:
在用梯度洗脱法测西洋参含量时出现气泡,因我是刚刚接触梯度法,特向各位老师请教,有没有去除气泡的方法。
西洋参的流动相和梯度设置如下:
乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B
时间(分钟)            流动相A(%)                流动相B(%) 0~25                    19→20                      81→80       
25~60                    20→40                      80→60
60~90                    40→55                      60→45
90~100                  55→60                      45→40   

1。流动相在使用前要脱气久一点。
2。在仪器的终端加装一个混匀器就好了
mantianxing1980
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sky2006
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