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液相色谱（LC）

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仪器社区 > 色谱 > 液相色谱（LC）帖子详情

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主题：【求助】HPLC流动相的选择

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syxin

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发表于：2007/07/06 17:36:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：20积分状态：已解决

大家好：
本人在做HPLC时，选择了甲醇水，乙腈水，无论如何调整比例
其有效峰始终在3分钟左右，加大水到90（甲醇，乙腈10）的比例还不行
请问：
我应该怎么办，加入TFA 等离子对物质吗？这种物质对我的物质影响很大，因为我的物质酸性环境基本没效了

推荐答案：深海的海豚回复于2007/07/08

1. 系统峰出现的时间通常容易固定，这样，你可以通过更改其他一根色谱柱，很容易避开3.1分钟的保留时间上的冲突。
2.“6分钟时，突然出现一个倒峰，达到-500mAu，然后就陡然上升很高”，这么看来这个峰应该相当的大了，用的是什么检测器呢？设定波长是否正确？参比波长呢？
3. 仪器上的那个提示不一定是指的purge的脱气，不知道你用的什么仪器，是否有相关问题说明，可以咨询一下售后工程师。会不会是真空脱气机的问题呢？真空脱气机负压不足的报错提示？

补充答案：

biotrandglobal回复于2007/08/03

谢谢了.

jice回复于2007/08/04

很好

恐龙回复于2007/07/06

看你是什么化合物，可能要选择其它类型的柱子。

zymlby回复于2007/07/08

努力加油就可以

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2007/7/6 19:00:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

换用其他柱子试试看；
选用C载量高的那种；
微调pH值；
使用缓冲盐体系。
你需要目标峰多长时间出现？

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恐龙

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2007/7/6 21:10:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

看你是什么化合物，可能要选择其它类型的柱子。

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syxin

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2007/7/8 12:12:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

保留时间为3.1分钟
而且这个时间段正好是系统峰出现的时间，如何避开呢？
还有两种现象，请大家指点一下
1、在跑到中间时段，6分钟时，突然出现一个倒峰，达到-500Amu
然后就陡然上升很高，就在几秒钟，这是什么原因
2、本人的HPLC仪器上老是提示
degasser vacuum is insufficient for proper degassing

应该是说脱气不充分吧可是当我按PURGE后，为防止脱气不好，又用医用注射器从外面抽，为什么还提示不行？？？

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syxin

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2007/7/8 13:06:00 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

除了更换真空脱气装置
还有其它方法？？

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2007/7/8 15:05:00 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

努力加油就可以

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深海的海豚

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2007/7/8 15:16:00 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 syxin 发表:
保留时间为3.1分钟
而且这个时间段正好是系统峰出现的时间，如何避开呢？
还有两种现象，请大家指点一下
1、在跑到中间时段，6分钟时，突然出现一个倒峰，达到-500Amu
然后就陡然上升很高，就在几秒钟，这是什么原因
2、本人的HPLC仪器上老是提示
degasser vacuum is insufficient for proper degassing

应该是说脱气不充分吧可是当我按PURGE后，为防止脱气不好，又用医用注射器从外面抽，为什么还提示不行？？？

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fmwxq

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2007/7/8 16:00:00 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以走梯度看一下,梯度不行的话,我建议还一个亲水性的柱子试一下

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2007/7/8 19:25:00 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 syxin 发表:
大家好：
本人在做HPLC时，选择了甲醇水，乙腈水，无论如何调整比例
其有效峰始终在3分钟左右，加大水到90（甲醇，乙腈10）的比例还不行
请问：
我应该怎么办，加入TFA 等离子对物质吗？这种物质对我的物质影响很大，因为我的物质酸性环境基本没效了

你的样品应该是个极性化合物物，用亲水柱试试（AQ柱）

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tanggangfeng

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2007/7/8 19:34:00 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 syxin 发表:
保留时间为3.1分钟
而且这个时间段正好是系统峰出现的时间，如何避开呢？
还有两种现象，请大家指点一下
1、在跑到中间时段，6分钟时，突然出现一个倒峰，达到-500Amu
然后就陡然上升很高，就在几秒钟，这是什么原因
2、本人的HPLC仪器上老是提示
degasser vacuum is insufficient for proper degassing

应该是说脱气不充分吧可是当我按PURGE后，为防止脱气不好，又用医用注射器从外面抽，为什么还提示不行？？？

1）出倒峰一般是在吸收波长吸收强度小于参比波长的吸收强度时会有倒峰。
2）还没碰到过，但你所用的溶剂做时不应该用大量气泡产生阿，而且你的脱气机还在工作吧。建议先用异丙醇冲洗下各通道再试试。如果你是等度的，可以先混合后超声或通氦气也可以赶气泡。

祝早日解决问题

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2007/7/8 20:16:00 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tanggangfeng 发表:
原文由 syxin 发表:
大家好：
本人在做HPLC时，选择了甲醇水，乙腈水，无论如何调整比例
其有效峰始终在3分钟左右，加大水到90（甲醇，乙腈10）的比例还不行
请问：
我应该怎么办，加入TFA 等离子对物质吗？这种物质对我的物质影响很大，因为我的物质酸性环境基本没效了

你的样品应该是个极性化合物物，用亲水柱试试（AQ柱）

应该是这样

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