主题：【资料】液相色谱日常维护与常见故障排除（二）

排除故障应遵循的几条基本规则

1 一次规则：当系统出了故障，你可以试探性地改变某些状态，一次可以改变一个参数。例如，限制色谱峰拖尾的问题，可以依次改变流动相，换保护柱，换分析柱等。做一些简单的改变步骤，也许就能解决问题。

2 二次比较规则：在手动检修之前已经明确了故障所在，或者已经确定了解决故障的方案。换句话说，动手之前已经找对了解决办法，例如，在进样过程中发现内标物的峰值变低了，可以重复进样看看重复性如何，如果是偶然变低，是否是定量管理进了气泡。这个规则可用于考察系统改变后的情况。更换了流动相后在正式进样前可以进两次标准品以检查保留时间的稳定情况和色谱峰的稳定性。在梯度洗脱中如果出现了多余的峰，可以空载梯度洗脱一次（真的有问题吗？），用此规则可以避免不必要的改变，尽快确定纠正措施。

3 取代规则：用好的部件换下可疑的部件，是查找故障的最好方法。如果你怀疑检测器引起了噪音，就换一个性能好的检测器。如果故障排除了，那就说明换下的检测器有问题，这个规则应用的规模有大有小，可以从换整个部件到换印刷线路板上的集成块。

4 换回规则：这个规则和取代规则是一起运用的，好部件取代了可疑部件后情况并未得到改善，应重新换上原部件。这样做维修的费用最小，也防止了用过的部件积压下来。这条规则仅适用于

单一的故障。换回规则不适用于以下的情况：

（1）      在取下时新部件已损坏（如泵的密封圈）；

（2）      部件价格低（如柱内衬过滤片）；

（3）      重新装上原部件要损坏的风险；

（4）      定期更换的部件。

5 参考条件规则：通常有两种参考条件：（1）标准参考条件；（2）试验参考条件。

    标准参考条件也叫标准实验条件。是从一个系统到另一个系统，从一个实验室到另一个实验室都易于验证的条件。用该条件所测得的数据有助于识别实际试验和系统间的问题，如果在某实验条件下系统压力升高，而在标准条件下压力正常，这说明系统异常是由实验室的变化所引起的。用标准条件验收新的液相色谱系统是最方便的，也易于与厂家联系。

表2中列举了起用新色谱柱时的标准试验条件，在使用过程中也可用此标准试验条件检查系统的情况。

    试验参考条件适用于检查正常系统每天的工作情况。要选最方便的方法验证这种条件。每天可以打印两张校正用色谱图作对照，检查保留时间、峰宽、系统压力方面的变化。发现峰的斜率、色谱柱塔板数和其他参数与原来色谱图相比有了变化，说明系统在运行中可能发生了问题。当然发生问题不结合实际分析程序考虑，只通过查找标准参考色谱图是不能一目了然的。

表2 色谱柱试验的标准参考条件

反相
流动相
甲醇/水（体积比=70/30）                               

色谱柱
C18

流速
1mL/min

检测器
UV254nm

样品
尿嘧啶（用于t0）

极性键合相
流动相
正己烷/异丙醇（体积比=75/25）

色谱柱
腈基

流速
1mL/min

检测器
UV254nm

样品
硝基苯，卞醇，2，4-二硝基甲苯，对硝基卞醇

正相
流动相
正己烷/二氯甲烷/异丙醇胺（体积比=95/4/1）

色谱柱
硅胶

流速
1mL/min

检测器
UV254nm

样品
2-苯-2-丙醇，甲卞醇，肉桂醇