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扫描电镜（SEM/EDS）
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主题：请教植物SEM的制样方法

浏览0 回复9 电梯直达
cangshijie
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发表于：2006/03/07 11:25:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家有做植物试样SEM的同仁,我想做下一些植物根径的SEM,但是原来一直没有做过,请问怎么简单处理就能做的,查阅的文章都比较烦琐,那种仪器必须要有的??
拜托!!
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cangshijie
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2006/3/7 14:48:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么没人理我呢??郁闷中
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hinsh
HinSH
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2006/3/7 18:09:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
本人一直做固体材料， 生物方面不熟。
只是听说的：
传统方法：
（1）临界点干燥 － 镀金 － 电镜观察
（2）冷冻转移 － 电镜观察 （这个技术国外应用很多，国内好象使用的很少。
新方法：
使用环境扫描电镜。
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奔跑的蜗牛
chenjianfeng
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2006/3/9 23:13:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
只要用刀子切好就可以了,别的需要就是电镜了
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常怀千岁忧
narcisus
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2006/3/10 13:34:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 HinSH 发表:
本人一直做固体材料， 生物方面不熟。
只是听说的：
传统方法：
（1）临界点干燥 － 镀金 － 电镜观察
（2）冷冻转移 － 电镜观察 （这个技术国外应用很多，国内好象使用的很少。
新方法：
使用环境扫描电镜。


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还可以以采用戊二醛固定，然后用酒精梯度脱水，镀金后观察。
有些电镜有冷冻台或环扫功能，可以直接观察
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angel8201
ANGEL8201
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2006/5/24 11:47:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么用戊二醛固定？作用是什么呀？用酒精是不是想加快干燥速度？镀金设备上不是有干燥吗 ？不好意思，我做的样品一直很单调，就是纺织方面的，样品准备都是直接切好了镀金观察，所以对其他的制样方法很好奇：）
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saintchen
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2006/5/26 15:17:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
复杂的方法，一般戊二醛脱水，酒精置换，临界点干燥、或冷冻干燥，喷金。

简单的方法，直接放入液氮冷却，然后放入低真空样品室，冰一边升华就一边可以看了。

环扫配上冷冻台也可以。
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xplg235689
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2010/6/4 8:52:54 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
乙醇梯度脱水，乙酸异戊脂置换乙醇，临界点干燥，喷金，电镜观察
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linzq
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2010/6/4 10:38:53 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第一步，清洗将要观察部位剥离出来，用针管吸蒸馏水冲洗表面
第二步将清洗好的样品投入（2.5-5）%戊二醛固定一般一至两天
第三步蒸馏水清洗后建议丙酮梯度脱水（50% 、60%、70%过夜、80%、90%、100%三次）
第四步可采用冷冻干燥法（根据冷冻干燥仪使用方法操作）
第五步蒸铂或金
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teufelmond
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2010/6/5 18:08:58 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1. 建议首先用磷酸清洗,仅仅是蒸馏水是无法清除掉附着力较强的污垢的,甚至有些样品表面还会有一些薄膜状组织,但是实在不好意思,磷酸浓度我给忘记了.....
2. 用2.5%的戊二醛浸泡过夜,这个过程被称之为"固定",也就是把样品形状给固定住.
3. 用不同浓度的无水乙醇梯度脱水(50% 60% 70% 80% 90% 95% 100%).
4. 用叔丁醇置换出样品内的无水乙醇,大致时间2小时左右.
5. 用冷冻干燥仪把样品内部的叔丁醇抽出.
6. 给样品表面喷金

基本就这样了,不过我不是看的植物,我接触的是生物方面,如有不雷同的地方,请您试着来吧.....
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