主题:请问用磷酸盐做流动相应该注意些什么问题?

浏览0 回复9 电梯直达
ggzzmm
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请问用磷酸盐做流动相应该注意些什么问题?过滤好的磷酸盐放在流动相瓶子里可以用多长时间?要不要每天过滤一遍啊?
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hplc0729
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用磷酸盐做流动相应该注意:
1.用前要用磷酸调PH值,使其达到所要求的PH值。
2.要现用现配,以免时间长缓冲盐析出和滋生细菌。
3.要一次配足,多次配的前后缓冲效果不一样,影响分离效果。
ahwyq
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补充一点:
使用过后及时用水小流量长时间冲洗,而后在用纯试剂冲洗。
ggzzmm
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原文由 hplc0729 发表:
用磷酸盐做流动相应该注意:
1.用前要用磷酸调PH值,使其达到所要求的PH值。
2.要现用现配,以免时间长缓冲盐析出和滋生细菌。
3.要一次配足,多次配的前后缓冲效果不一样,影响分离效果。

谢谢各位啦。我是做研发的,一个实验要做两个星期,缓冲盐两天就用完了,就要重配了,所以比较难确保完全一样的缓冲系统。
tianru的爸爸
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原文由 ggzzmm 发表:
谢谢各位啦。我是做研发的,一个实验要做两个星期,缓冲盐两天就用完了,就要重配了,所以比较难确保完全一样的缓冲系统。

可以试试,将磷酸盐配成母液,然后高压灭菌,低温保存,可以保存时间长些。
量具最好每次用同一个,能更好地保证重现性。
niuyuehua
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我个人感觉磷酸盐流动相尽量现用现配,不要存放太久,如果晶体析出,会严重损坏柱子和泵内的密封垫圈,还有柱塞杆。
  所以做完后用水低流速长时间冲洗很有必要的。
kity28
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ming_9912
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配好流动相后要过滤,使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。   
lele123
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放置不超过24小时,一方面磷酸缓冲液易形成沉淀,另一方面是容易长菌。
hanke2006
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如果流动相里有超过20%的甲醇好象不是很容易长菌啊
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