主题:【已应助】色谱峰形不好怎么办?

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色谱峰形不好怎么办?如何进行峰形优化?

推荐答案:oscar_2007回复于2024/09/20
1.降低进样浓度,看峰形是否有所改善。 一般认为峰高在100mAU左右比较合适,不至于因过载影响峰形。
2.检查是否是用流动相溶解样品 溶解样品的溶剂洗脱能力比流动相强会发生峰前拖。
3.增加流动相中缓冲盐的浓度 增加缓冲盐浓度可以增大流动相中的离子强度,减少因静电的作用引起的前拖。
4.流动相中加入适量的四氢呋喃有时可以改善峰形、增大分离度。
5.升高柱温的温度 有助于增加流动相传质速率,减少因静电作用引起的前拖,但温度不宜太高,温度太高容易损伤色谱柱,特别是含有离子对试剂的时候,最好不要超过40℃。
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楼主,色谱峰形不好可能由多种因素导致,以下是一些常见的优化方法:

1.流动相优化:
调整流动相的组成比例:改变有机相和水相的比例,以改善峰形。
优化流动相的 pH 值:对于可离子化的化合物,适当调节 pH 可以改善峰形和分离效果。
更换流动相种类:有时使用不同的有机溶剂或缓冲盐可以改善峰形。

2.色谱柱选择与维护:
选择合适的色谱柱:根据样品的性质和分离要求,选择合适的固定相、柱长和内径。
色谱柱老化:新柱子或长期未使用的柱子进行适当的老化处理。
检查色谱柱是否损坏或污染,必要时进行清洗或更换。

3.?样品处理:
确保样品溶解完全,避免杂质的干扰。
优化样品浓度,避免浓度过高导致峰形展宽。

4.流速调整:适当降低或增加流速,有时可以改善峰形。

5.柱温优化:通过改变柱温来调整峰形和分离度。

6.进样量控制:减少进样量,防止过载导致峰形不佳。

7.仪器系统检查:

检查泵的性能,确保流速稳定。
检查检测器的灵敏度和响应是否正常。

dadgoh
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液相色谱峰型差的优化可以通过调整流动相的组成、pH值、柱温以及优化色谱柱条件来实现。

液相色谱(HPLC)中,峰型差的问题通常与流动相的性质、色谱柱的状态、样品处理以及实验条件有关。优化峰型和提升分离度的方法包括:

1、调整流动相组成:开始时使用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。每减少10%的有机溶剂量,保留因子约增加3倍,这是一个有效的优化方法。

2、三倍规则:通过减少有机溶剂的比例,每次减少的量不超过10%,可以观察到保留因子的显著增加,这是一个聪明且省力的办法。

3、流动相的pH值:对于弱酸或弱碱样品,通过调节流动相的pH值,可以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,从而改善峰形。

4、色谱柱的选择和维护:确保使用合适的色谱柱,并注意色谱柱的物理损坏、污染以及柱内填料的状况。定期对色谱柱进行维护,如清洗和再生,以保持其性能。

5、样品处理:确保样品纯净,避免样品中的杂质影响峰型。必要时,对样品进行预处理,如使用保护柱或样品预处理柱。

6、柱外效应:检查进样阀、色谱柱及检测器间的管路,确保管路长度适当、内径一致,并减少不必要的死体积,以避免峰扩展和峰形拖尾。
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2024/9/19 10:15:24 Last edit by v3141805
oscar_2007
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1.降低进样浓度,看峰形是否有所改善。 一般认为峰高在100mAU左右比较合适,不至于因过载影响峰形。
2.检查是否是用流动相溶解样品 溶解样品的溶剂洗脱能力比流动相强会发生峰前拖。
3.增加流动相中缓冲盐的浓度 增加缓冲盐浓度可以增大流动相中的离子强度,减少因静电的作用引起的前拖。
4.流动相中加入适量的四氢呋喃有时可以改善峰形、增大分离度。
5.升高柱温的温度 有助于增加流动相传质速率,减少因静电作用引起的前拖,但温度不宜太高,温度太高容易损伤色谱柱,特别是含有离子对试剂的时候,最好不要超过40℃。
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