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液相色谱（LC）

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主题：【求助】色谱峰形不好怎么办？

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ppttmmyy

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发表于：2024/09/19 00:39:15 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱峰形不好怎么办？如何进行峰形优化？

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2024/9/19 9:54:38 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼主，色谱峰形不好可能由多种因素导致，以下是一些常见的优化方法：

1.流动相优化：
调整流动相的组成比例：改变有机相和水相的比例，以改善峰形。
优化流动相的 pH 值：对于可离子化的化合物，适当调节 pH 可以改善峰形和分离效果。
更换流动相种类：有时使用不同的有机溶剂或缓冲盐可以改善峰形。

2.色谱柱选择与维护：
选择合适的色谱柱：根据样品的性质和分离要求，选择合适的固定相、柱长和内径。
色谱柱老化：新柱子或长期未使用的柱子进行适当的老化处理。
检查色谱柱是否损坏或污染，必要时进行清洗或更换。

3.?样品处理：
确保样品溶解完全，避免杂质的干扰。
优化样品浓度，避免浓度过高导致峰形展宽。

4.流速调整：适当降低或增加流速，有时可以改善峰形。

5.柱温优化：通过改变柱温来调整峰形和分离度。

6.进样量控制：减少进样量，防止过载导致峰形不佳。

7.仪器系统检查：

检查泵的性能，确保流速稳定。
检查检测器的灵敏度和响应是否正常。

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dadgoh

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2024/9/19 9:56:54 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

说一下是啥流动相，及柱子型号规格。

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通标小菜鸟

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2024/9/19 10:06:25 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相色谱峰型差的优化可以通过调整流动相的组成、pH值、柱温以及优化色谱柱条件来实现。

液相色谱（HPLC）中，峰型差的问题通常与流动相的性质、色谱柱的状态、样品处理以及实验条件有关。优化峰型和提升分离度的方法包括：

1、调整流动相组成：开始时使用90%的乙腈（或甲醇）/水（或缓冲溶液）进行试验，然后根据出峰情况调整有机溶剂（乙腈或甲醇）的比例。每减少10%的有机溶剂量，保留因子约增加3倍，这是一个有效的优化方法。

2、三倍规则：通过减少有机溶剂的比例，每次减少的量不超过10%，可以观察到保留因子的显著增加，这是一个聪明且省力的办法。

3、流动相的pH值：对于弱酸或弱碱样品，通过调节流动相的pH值，可以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，从而改善峰形。

4、色谱柱的选择和维护：确保使用合适的色谱柱，并注意色谱柱的物理损坏、污染以及柱内填料的状况。定期对色谱柱进行维护，如清洗和再生，以保持其性能。

5、样品处理：确保样品纯净，避免样品中的杂质影响峰型。必要时，对样品进行预处理，如使用保护柱或样品预处理柱。

6、柱外效应：检查进样阀、色谱柱及检测器间的管路，确保管路长度适当、内径一致，并减少不必要的死体积，以避免峰扩展和峰形拖尾。

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2024/9/19 10:15:24 Last edit by v3141805