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毛细管电泳（CE）

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主题：【求助】如何借助CCD精确地测量出capillary内一小段液柱的体积？

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chinatokorea

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发表于：2007/09/13 16:26:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

实验室前人的方法是PDMS制作出一个分子尺（最小刻度可达到20 micrometer）,然后在显微镜下与液柱进行对比，估计出长度，再利用内径计算出体积

我提出的一种简便方法，先有CCD照像，通过Photoshop放大之后，用该软件的“量度工具”分别测量出capillary内有色液柱的长和宽，而液柱的长度，我近似看成是capillary内径的长度（已知），通过比例关系可以计算出有色液柱的长度。

师兄告诉我一种方法，先在monitor上找到想要测量的对象，然后通过载物底座的千分尺调节将测量对象移到monitor的一端，记下此时的千分尺刻度值A，然后再通过千分尺将对象移到monitor的另一端，再记下一个值B,这样A与B的差值就是所测对象的长度，当然前提是所测对象要尽量保持“水平”的状态。

感觉上面的这三种方法都不大好，请问大家还有什么好的方法吗？

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2007/9/14 13:30:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

强人啊

移动毛细管好象不是太好的方法，能保证里面的液柱没有滑动吗？另外液柱在毛细管里面因表面张力及浸润作用造成的偏离“水平”的变形在可以接受的范围内吗？PHOTOSHOP放大图片后造成的象素等等模糊误差可以接受吗？你们做的东西好象不太懂啊

不过我做这类实验（当然跟强人的没法比）时，会想办法让液柱“自然”挥发掉，比如用低真空慢慢晾着，在柱内表面留下显色的东西（比如白色粉末或是一点颜色啊啥的），然后再做。当然这个方法误差还是不小，不知道适合你们不

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2007/9/18 14:20:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

首先谢谢synesis的跟贴！你写得这一段给了我一定的启发！

用我所用仪器所配的CCD放到最大倍数，毛细管从显示屏幕的一侧移动到另一侧大概需要1.5 mm, 底座上的千分尺大概转3圈的样子！移动的距离比较小。另外，我所用的毛细管是有tip的，tip的直径为20微米左右，不加“外力”的话，里面的液体很难溢出，所以不用担心内部的液柱会发生移动。

另外，你所提出的方法，对我的实验不太适用，因为我想测的液柱长度大概为100个微米左右，而且液柱的两测还有特定的溶液进行“包裹”。

不过，还是要非常感谢你的热情跟贴！祝你的实验顺利！

若在我学会如何给别人加分之前，还是没有人建设的意外的话，我会将20分加给你！！呵呵！！！

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