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主题：【求助】没有配冷台的sem直接观察经液氮冷冻的材料对电镜是否有损伤，损伤有多大？

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plasmodesmal
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发表于：2008/08/29 10:57:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有配冷台的sem直接观察经液氮冷冻的材料对电镜是否有损伤，损伤有多大？谢谢
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2008/9/2 15:46:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 plasmodesmal 发表:
没有配冷台的sem直接观察经液氮冷冻的材料对电镜是否有损伤，损伤有多大？谢谢


应该看不了吧！我有试过，由于冷台温度没降下来（当时还在-5度左右，心太急了），刚上高压，低液氮冷冻过的样品就整个模糊了，结果只能重新做样。
不过对电镜没什么影响，之后我校正SEM时拍了10万倍的图片和原来验收时对比，没多大区别。
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plasmodesmal
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2008/9/2 18:18:26 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您看的什么样品？我做的生物材料，昨天我用液氮做了一把，效果很好，我觉得偶尔sem偶尔做这么做一次没有问题，但是如果做的比较频繁的话对sem的影响是比较大的
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2008/9/3 3:28:07 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对电镜本身不会有任何影响。
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plasmodesmal
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2008/9/3 15:33:37 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您好，我咨询过学校电镜室的老师，他们说用液氮冷冻的方法观察多了的话会污染物镜光阑，电镜工程师也说这么做可以，但是做多了会损坏电镜的真空系统，并导致物镜光阑的污染（我做的主要是生物含水样品），不知道您怎么看？谢谢
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2008/9/4 20:04:33 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我认为电镜的污染总是存在的，正常的情况下主要的污染源是真空系统，灯丝以及外界不小心带入的东西。
我不做生物样品，发现做带有润滑剂机油等的样品(有时需要这样)和清洗干净了的样品污染情况没有两样，如果真空效率可以的话。
样品小，观察时间不长，电压不高及束流不大的情况下(成像稳定)的情况下不会有问题的。
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2008/9/4 20:09:43 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
冷冻和不冷冻的生物样品，差别只是温度，如果在电子轰击下有大量挥发物逸出，图像会不稳定的。我不认为在图像稳定的情况下还会造成污染。
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plasmodesmal
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2008/9/5 11:19:19 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
生物样品一般含水，比如说叶子、茎等，如果不用冷冻做的话，通常我们会先将样品进行干燥，然后喷金，最后在sem下观察，所以冷冻样品和非冷冻样品的区别还有一点应该是含不含水，我觉得水对电镜污染可能比较大
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bigbug51
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2009/2/1 8:33:30 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 plasmodesmal 发表:
生物样品一般含水，比如说叶子、茎等，如果不用冷冻做的话，通常我们会先将样品进行干燥，然后喷金，最后在sem下观察，所以冷冻样品和非冷冻样品的区别还有一点应该是含不含水，我觉得水对电镜污染可能比较大


在环境扫描电镜下结合冷台，可以保持样品在水分不流失，大概0摄氏度615Pa。临界点干燥+喷金也是很好的选择，但是并不能保证样品完全不变形。
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wildonkey
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2009/2/4 21:58:10 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对仪器没什么影响，只怕你的样品暴露再空气中及热传导下，维持冷凝状态的时间较短。
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