主题：【讨论】图谱来找茬【第一季】

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发表于：2008/10/17 15:19:16 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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大家图谱来找茬:
要求:1.找出图谱中存在的问题(越多越好噢!)
2.根据图谱中存在的问题提供一些解决方案.
3.以后碰到这样的问题需要注意的地方.
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目的：研究三七的指纹图谱。
色谱条件为:Eclipse XDB-C18（ODS-2，250×4.6 mm，5 μm）,乙腈-水梯度洗脱,温度:35℃,检测波长:203nm;流速1.0ml/min.进样量:10ul.
检测样品：三七.
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图谱为:

推荐答案：风之彩回复于2008/10/18

楼主做三七的指纹图谱，看了一下你的色谱条件，除了梯度看不到，基本算是经典的方法。但是你的图谱实在是...
先看看别人的三七的指纹图谱

要指纹图谱走的好，色谱条件很关键，但是还有其他的细节。
三七的主要成分是皂苷，所以，指纹图谱主要是要测定皂苷，那么你的样品前处理就很重要，就是要把你要测定的成分从药材中提取出来。看了你的图谱，似乎很多标志性的皂苷不明显，所以，第一，你的样品提取方法是否有问题，这是你走好指纹图谱的前提。
再来看你的图谱，显然，梯度似乎不合适，导致有的地方没有峰，有的地方峰扎堆而没有分开，且峰形很难看。你应该先查好文献，大概知道三七里面的主要成分有哪些，用对照品大概摸一下你的梯度，峰少且间隔时间长的时间段，有机相比例和流速可以适当加大一些，遇到峰多的地方，有机相比例和流速可以适当的小一些，峰最好能基线分离，用梯度洗脱力求保证峰形好且分离的情况下，时间尽可能短。
还有基线下漂，看看平衡时间是否足够、检测池是否脏了等。

还有你的柱子是否干净？最好用空白溶剂先走一遍，以免出现鬼峰。

补充答案：

ygx回复于2008/10/19

1.运行时间太长:应该是梯度不合适或流动相选择不合适.
2.色谱图谱中间无有峰出现,都在开始和结束出现,梯度不合适.
3.峰的分离情况不好.
4.检测的波长好象不太合适,在远紫外区时,溶剂的干扰大.
5.可以采用填料粒度更小,柱子短的色谱柱,来缩短分析时间.
6.是否有溶剂干扰,从图谱上看不出.

xy200609回复于2008/10/17

分析时间太长,建议改为粒径较小的快速分离柱.
应先做空白溶剂图谱确定溶剂峰和系统峰,而后在样品图谱中加以扣除.

zhufangwei回复于2008/10/17

1、分析时间太长，中间都没有峰，可以提高有机相比例撒；
2、乙腈水梯度比例调一下，使得前面的峰尽量后延，后面的峰早点出来；
3、选择的检测波长和乙腈、甲醇的相近了，干扰很大吧，是否可以选择次波长进行尝试；
其实我液相做的少，液质做的多，请大家批评指正了

tonghuahuaxue回复于2008/10/17

1.样品用流动相溶解，若不行，作空白，解决掉谱图前部问题
2.流动相不合适，分离度、峰形都不太好
3.在分离度、峰形比较满意的前提下，解决分析时间长的问题