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主题：【哺育新手活动】色谱柱的使用和维护

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发表于：2009/03/19 17:09:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被老多_小多设置为精华； 奖励积分记录： 老多_小多(5分)
一、色谱柱的使用
反相色谱柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流动相和甲醇或乙腈能够互溶。色谱柱在保存过程中有可能因为溶剂的挥发而干涸，所以在使用流动相分析之前应使用10—20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。如果所使用的流动相中含有缓冲盐，则应注意用水作为过渡，而不能直接将有机溶剂和缓冲盐直接混合。测试结束后冲洗柱子也要注意这一点。还有一点需要注意的是最好不要使用纯水冲洗色谱柱。对于非极性柱，比如C8和C18，由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链，造成柱效下降。另外，分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜，出现样品不保留而使分离度下降，重复性差，所以对于一般的C8和C18柱，有机溶剂的比例不应低于5%。
二、色谱柱的再生
再生过程中用来冲洗色谱柱的溶剂体积可以参照下表：


再生过程及溶剂冲洗顺序可参见下表：




三、色谱柱的维护
1.尽量能够使用预柱或保护柱保护色谱柱；
2.大多数色谱柱的PH范围是2—8，尽量不要超过范围使用；
3.避免流动相的组成或比例急剧变化；
4.流动相使用前必须进行过滤和脱气处理；
5.如果使用极性或粒子性的缓冲液作流动相，实验完毕后应将色谱柱冲洗干净。


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老多_小多
emoc98311
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2009/3/19 17:37:29 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
图发错了还可以修改的，我给你改了
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〓猪哥哥〓
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2009/3/19 22:44:27 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
冲洗残留性强的物质用硫酸。
是硫酸水溶液和有机相一起冲洗？一般比例多大？
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风行
caozk
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2009/3/20 20:11:10 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
同问楼上的问题。
请楼主赐教。
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wangyad168
wangyad168
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2009/3/21 13:29:38 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 caozk 发表:
同问楼上的问题。
请楼主赐教。

文章已看，写的很好．
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IC_007
suppressor
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2009/3/21 19:22:50 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
文章不错，经验之谈，学习中
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flytiger603
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2009/3/21 20:26:43 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我很少用硫酸冲的，我一般用0.01%的磷酸洗。硫酸一般用0.05mol的就可以了
主要根据你柱子的使用说明书来就不会错的
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ppttmmyy
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2009/3/22 20:59:14 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
总结的比较全面,而且也实用!
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tony6774
tony6774
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2009/3/25 15:23:03 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
挺系统，不错！
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fengxuemei
fengxuemei
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2009/3/25 17:13:59 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请教一下：如果不小心用水冲洗了柱子，且让水在柱子里保留过夜，会不会对柱子造成不好的影响啊？
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村长
ycsun2003
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2009/3/30 9:32:18 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果水相没有缓冲盐，第二天早上就用有机相冲问题不大
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