主题：【讨论】图谱来找茬(第八季)-肩峰/叉峰解析

fengxuemei回复于2009/05/22

请您来解析:
1.产生肩峰或叉峰是我们很不愿意看到的，因为它的出现与柱子的关系很大，那产生的原因一般有哪些？
可能原因有：柱子被污染；柱子塌陷；样品浓度过高或进样量过多导致柱子负载；样品中的物质没有被充分分离。

2.平时实验中怎样有效避免肩峰或叉峰的出现呢？
避免的方法有：对柱子注意清洁保护以免其被污染；对于非水性柱尽量少用大比例的水相冲洗柱子以防止柱子塌陷；注意样品的浓度配制和进样量；选择合适的流动相使样品得到充分分离。

3.对于已经产生肩峰或叉峰，你有什么好的处理方法去进来弥补？
视具体情况具体解决。对于柱子污染的，冲洗、再生柱子；柱子塌陷的就没办法了；样品的问题是可以调节的。

风之彩回复于2009/05/23

1.产生肩峰或叉峰是我们很不愿意看到的，因为它的出现与柱子的关系很大，那产生的原因一般有哪些？
可能原因有：1 样品没有处理干净或者长时间进样没有清洗柱子导致柱效下降；2 样品浓度过高或进样量过多；3 流动相pH值不合适；4 样品不纯，目前条件没有充分分离杂质等

2.平时实验中怎样有效避免肩峰或叉峰的出现呢？
避免的方法有：1 样品尽量处理干净，进样一段时间后要充分清洗色谱柱，必要时加保护柱；2 不要进太浓的样品；3 流动相pH值要合适；4 条件色谱条件使样品分离。

3.对于已经产生肩峰或叉峰，你有什么好的处理方法去进来弥补？
解决的办法有：如果是样品污染柱子，可以冲洗色谱柱或者更换保护柱；调节合适的流动相pH值来优化峰形；调节流动相比例等使样品杂质充分分离。

Mow回复于2009/05/25

1.产生肩峰或叉峰是我们很不愿意看到的，因为它的出现与柱子的关系很大，那产生的原因一般有哪些？
答：肩峰或叉峰的出现一般由于色谱柱填料流失引起，导致柱头塌陷，而导致填料流失的原因比较多。其他原因还有静电对工作站和检测器的屏蔽干扰。
2.平时实验中怎样有效避免肩峰或叉峰的出现呢？
答：在日常实验中，由于色谱柱的特殊结构（硅胶柱和键合相柱），以及固定相的稳定性受填装密度和使用维护影响重大。所以在使用时候，因注意以下几点：
2.1 不经过前处理，直接上柱分析吸附性强、杂质含量非常多的样品。否则易导致永久性吸附和柱子堵塞，导致固定相提前OVER。
2.2 在冲洗柱子的时候，反相柱，如C18柱应避免用纯水相冲洗（可用5%有机比例以上的有机水溶液来冲洗），不然硅胶基质经常在全水相冲洗下，键合键容易被冲散，柱头也就很容易塌陷了。
2.3 在使用色谱柱时候，应避免经常在强酸性和强碱性流动相中分析样品。否则，容易导致硅胶基质被腐蚀破坏。
2.4 避免使用含较高浓度金属离子的水和试剂（如自然水），不然容易产生金属离子效应，直接影响色谱柱的寿命。
2.5 不要经常拆卸柱头，否则易导致柱头的填料直接损失，同时也容易影响填料填装紧度。
3.对于已经产生肩峰或叉峰，你有什么好的处理方法去进来弥补？
答：如果是属于静电干扰导致，仪器和工作站接地即可解决（N2000又一定几率会出现这类现象）。
如果是属于填料流失导致的，反冲和再生是没什么效果的，修补柱头是一个比较好的办法。即打开柱头，清洗或者更换柱头筛板，然后挖去部分已经变性的填料，然后用和这根色谱柱一个规格的填料填补回去，具体为加一滴分散剂（四氯化碳和二氧六环混合液），然后补一点填料，轻轻敲平，然后，重复添加几次，直到填料已经填满柱管平口为止（有时候高1mm会比较好）。修补后，用纯甲醇冲洗2小时以上方可使用。本人一朋友在巨化集团，就是得益于这样的修补技术，那根C18柱，每天工作4小时左右，已经有了10年的寿命。
回答完毕，很高兴和各位同行、色谱分析员交流。

zhao1025回复于2009/05/26

1.产生肩峰或叉峰是我们很不愿意看到的，因为它的出现与柱子的关系很大，那产生的原因一般有哪些？

我们辟开分析方法的原因，只谈为什么会出现肩峰和叉峰。
举个例子：
色谱柱有如一个海底的通道，人们可以在海底看到各种各样的景色。一群人一起进入通道，各个人被不同的景色所吸引，所以大家观看的时间都不一样，所以，大家是陆续从海底通道的另一端出来了。
所以某一样品进入色谱柱，各物质与固定相间作用不同，时间也不同，最终陆续的出峰。
为什么肩峰和叉峰呢？比如海底全污染了一片黑呼呼的，每个人进去了肯定不会逗留。色谱柱被污染了，化合物与固定相之间的相互作用弱了，大家出来的时间就相近了，就出现了叉峰和肩峰。在比如海底通道不允许观看景色了，人们进去肯定很快就一起出来了，就像色谱柱填料倒塌了，此时分离效果差了，就出现肩峰和叉峰了。
肩峰和叉峰可能是分离度不好是几个峰，也可能就是一个峰，只不过因为柱原因，例如死体积啊，出现了问题。
例子不是很确切，但是意思应该很明白


2.平时实验中怎样有效避免肩峰或叉峰的出现呢？

色谱柱维护是避免肩峰和叉峰的有效措施之一！那么如何维护：
1、仔细阅读柱说明书
2、仔细学习产品及样品的性质，确定比较好的冲洗液

注意正确的安装色谱柱，特别是柱头

有预柱的话，注意好预柱的使用及更换、维护

3.对于已经产生肩峰或叉峰，你有什么好的处理方法去进来弥补？


1、冲洗色谱柱，一般情况下，不要反冲；
2、可以考虑拆下筛板清洗，此时根据说明书或者咨询工程师
3、在柱前面加填料，这也是补救的措施
4、至于液相色谱的再生，就不说了，论坛上说了很多，注意冲洗的顺序，及做好相应的记录，便于以后查询