2.平时实验中怎样有效避免肩峰或叉峰的出现呢?调节样品的pH值在合适的位置,不要用极性太强的溶剂长时间的冲柱子。
样品处理尽可能干净,做完样品一定做好色谱柱的清洗工作。
尽量少做低PH和过高PH的流动相。
选择合适的流动相,减小进样量,用保护柱,做样后及时冲洗注意保养。柱子长时间不用时用纯有机相(一般的柱子)封存。
避免方法有:
1.用方法中流动相比例、流速冲洗柱子30分钟。
2.尽量采用成熟方法进行
液相操作。
3.更换柱子。
4.排查流动相中是否有流动死角。
使用正确的流动相,可以很好的保护柱子,避免肩峰或叉峰出现。
1.平常工作中注意流动相和样品的过滤,定期更换新流动相,防止系统管路阻塞;
2.样品尽量处理干净,按要求使用色谱柱,定期检查柱效;
3.注意控制样品浓度,防止过载。
避免的方法有:对柱子注意清洁保护以免其被污染;对于非水性柱尽量少用大比例的水相冲洗柱子以防止柱子塌陷;注意样品的浓度配制和进样量;选择合适的流动相使样品得到充分分离。
避免的方法有:1 样品尽量处理干净,进样一段时间后要充分清洗色谱柱,必要时加保护柱;2 不要进太浓的样品;3 流动相pH值要合适;4 条件色谱条件使样品分离。
用流动相配样,采用适当的样品进样量, 选用合适的色谱柱 ,及时维护仪器
在日常实验中,由于色谱柱的特殊结构(硅胶柱和键合相柱),以及固定相的稳定性受填装密度和使用维护影响重大。所以在使用时候,因注意以下几点:
1 不经过前处理,直接上柱分析吸附性强、杂质含量非常多的样品。否则易导致永久性吸附和柱子堵塞,导致固定相提前OVER。
2 在冲洗柱子的时候,反相柱,如C18柱应避免用纯水相冲洗(可用5%有机比例以上的有机水溶液来冲洗),不然硅胶基质经常在全水相冲洗下,键合键容易被冲散,柱头也就很容易塌陷了。
3在使用色谱柱时候,应避免经常在强酸性和强碱性流动相中分析样品。否则,容易导致硅胶基质被腐蚀破坏。
4 避免使用含较高浓度金属离子的水和试剂(如自然水),不然容易产生金属离子效应,直接影响色谱柱的寿命。
5 不要经常拆卸柱头,否则易导致柱头的填料直接损失,同时也容易影响填料填装紧度。
色谱柱维护是避免肩峰和叉峰的有效措施之一!那么如何维护:
1、仔细阅读柱说明书
2、仔细学习产品及样品的性质,确定比较好的冲洗液
注意正确的安装色谱柱,特别是柱头
有预柱的话,注意好预柱的使用及更换、维护
注意仪器保养,严格按照操作规程做,样品过滤,选择合适的色谱柱(很重要),注意实验条件。
开展好预试验,选择合适的样品提取方法;选用合适的流动相及其比例。
减小体积,采用较弱的样品溶剂 ,更换色谱柱,更换比例,更换流动相