主题:【求助】色谱柱封尾问题

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huaibeijiayuan
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看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章,里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题,这个在怎么理解,能详细解释一下吗?有哪些注意事项呢?
原文如下:


中药成份的化合物通常分子量不会太大,120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径,因为分析大分子的机会并不是很多,这个时候60A80A100A120A对分离都不会有太大的影响,倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些,因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A100A120A这种。现在做多肽的越来越多,考虑到多肽通常分子量比较大的原因,他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml
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小卢
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柱封尾、碳载量问题也经常听到专业工程师讲,但用的少,感觉每次都没听进去。现在再来学习一下!
plexu
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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。
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358579047
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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。
学习了,很好的解说
huaibeijiayuan
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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。
yongw
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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

讲的很专业!学习了
zxhcnf
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看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章,里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题,这个在怎么理解,能详细解释一下吗?有哪些注意事项呢?
原文如下:


中药成份的化合物通常分子量不会太大,120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径,因为分析大分子的机会并不是很多,这个时候60A80A100A120A对分离都不会有太大的影响,倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些,因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A100A120A这种。现在做多肽的越来越多,考虑到多肽通常分子量比较大的原因,他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml


载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少,载炭量越大,固定相表面的疏水性就越强,与非极性化合物间的作用力就越大,因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强,相同条件下,载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚,在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响,通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾,因此,对带有-NHR、-NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析,为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱,封尾越彻底,化合物接触硅羟基的机会就越小,拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点,在良好封尾的色谱柱上保留能力不足,需要更多一点保留时,硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点,比封尾的色谱柱能获得更好的保留;此外,封尾试剂通常是用小分子的硅烷,这种小分子硅烷在强酸性条件下(pH<2)时因Si-C键的断裂而容易流失,造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳,而不封尾的填料则没有这个影响,因为Si-O在强酸性(除HF外)条件下稳定性依然很好,所以在强酸性条件下分析时,为避免色谱柱很快就坏掉,最好选择没有封尾的色谱柱,我们的LP-C18就是没有封尾的,能耐到pH 1的强酸性条件。
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2010/6/29 17:30:30 Last edit by zxhcnf
samanthalas
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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。

在选择色谱柱之前,如果已知待测化合物的极性较强,那么在载碳量较高的C18色谱柱上保留都会很短,导致分不开。这时就要考虑用载碳量小的或者不封尾的C18柱。
月旭公司有几款针对极性较强化合物分离用的色谱柱,对极性化合物的保留由弱到强分别是:
AQ-C18,  XB-CN,  LP-C18
他们的载碳量分别是12%,7%,10%(不封尾)
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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。

实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。

在选择色谱柱之前,如果已知待测化合物的极性较强,那么在载碳量较高的C18色谱柱上保留都会很短,导致分不开。这时就要考虑用载碳量小的或者不封尾的C18柱。
月旭公司有几款针对极性较强化合物分离用的色谱柱,对极性化合物的保留由弱到强分别是:
AQ-C18,  XB-CN,  LP-C18
他们的载碳量分别是12%,7%,10%(不封尾)


AQ和LP有什么区别?
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