紫外可见分光光度计(UV)

主题:【第三届原创参赛作品】分光光度法快速测定葡萄酒中总酚的含量

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coffee8
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分光光度法快速测定葡萄酒中总酚的含量

1、原理


正常发酵生产的葡萄酒中富含多酚类化合物。试样中的多酚化合物在碱性条件下,与Foline phenol试剂形成蓝色物质,在765nm处测定吸光值,并与标准曲线比较来对葡萄酒中多酚类化合物进行定量检测。

2、仪器与试剂
1  紫外-可见分光光度计
2  Foline-phenol试剂:试剂公司购得
3  5%w/v)碳酸钠溶液:称取50g无水碳酸钠(分析纯),用水溶解并定容至1000ml
4400mg/L没食子酸标准溶液:称取0.1000g没食子酸,用蒸馏水溶解,定容至250ml,移入棕色瓶中,避光低温保存。


540mg/L没食子酸标准使用溶液:吸取上述溶液10ml,再用蒸馏水定容至100ml,现用现稀释。

3        步骤


1)标准曲线的制备

分别吸取0.0, 0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5ml没食子酸标准使用溶液(40mg/L)于比色管中(相当于含没食子酸0.020406080100120 140μg),各管分别用蒸馏水补至3.5mL,再分别加入1ml Foline-phenol试剂,用5%w/v)碳酸钠溶液定容至刻度,摇匀,放置10分钟后,于765nm处,1cm比色皿测定吸光值,绘制标准曲线。

2)样品的测定

先将样品稀释10倍,取适量体积V(视样品总酚含量确定)稀释液于25ml比色管中,再分别加入1ml Foline-phenol试剂,用5%w/v)碳酸钠溶液定容至刻度,摇匀,放置10分钟后,于765nm处,1cm比色皿测定吸光值,与标准系列比较。

3)计算公式


X ——样品中总酚(以没食子酸计)的含量,mg/L

  m ——测定样品中总酚(以没食子酸计)的含量,μg

  V ——测定样品的体积,ml

  N ——稀释倍数。

m可以通过m=K*A求得,也可用回归方程计算得出。

4、结果分析

1)葡萄酒中乙醇的影响

本方法主要研究干红和干白葡萄酒的总酚的测定,一般酒精含量都是在12%vol左右,根据样品测定过程中经过稀释,含量已经很小,通过实验证明乙醇的影响几乎没有,可以忽略!

2)干红中总酚含量远高于干白的含量。

3)此方法测定的结果只是一个大体的参考值,具体含量需用液相色谱做进一步的检测。

5、综述

葡萄酒中总酚含量的高低直接影响到葡萄酒的口感,品质的优劣。通过此方法的简单测量,通过数据可以对葡萄酒的好坏做一下简单的评价,结合自己品尝的口感,可以对其优劣做一下简答的评价。

适合于大众化的验证。甚至可以通过目视比色,得到一个大体的判断!
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coffee8
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这是当时做的标准曲线数据供大家参考!
m (μg)    0      20    40    60      80    100      120    140 
A      0.000  0.099  0.189    0.274  0.358  0.449  0.533    0.607
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2010/12/25 11:54:04 Last edit by coffee8
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coffee8
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祥子
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有图有真相。

很不错的文章。

问下楼主,稀释引入的误差有多大呢?

稀释和误差的关系?

zwyu
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正规操作下,稀释引入的可以忽略。

原文由 祥子(nemoium) 发表:
有图有真相。

很不错的文章。

问下楼主,稀释引入的误差有多大呢?

稀释和误差的关系?

社区=冬季=
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葡萄酒中总酚的含量一般限定是多少?
如果超标对人体的危害是怎么样的

祥子
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原文由 zwyu(zwyu) 发表:
正规操作下,稀释引入的可以忽略。

原文由 祥子(nemoium) 发表:
有图有真相。

很不错的文章。

问下楼主,稀释引入的误差有多大呢?

稀释和误差的关系?



哦,谢谢!
coffee8
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原文由 冬季(lylsg555) 发表:
葡萄酒中总酚的含量一般限定是多少?
如果超标对人体的危害是怎么样的



总酚没有一个限定值
总酚对人体应该是有益的
是葡萄酒中抗氧化的主要成分之一吧
初学者&九点虎
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问楼主一个外行问题,我家里有一瓶20年的白兰地,还能喝吗?
coffee8
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