主题：【极限体验&说出你的故事】Ultimate XB-C18柱定性分析黄酮类化合物（5月份）

Introduction
    黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A环和B环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。黄酮类小部分以游离态（苷元）的形式存在，多数与糖结合成苷。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方起着重要的作用。
    本实验研究对象为某中药中一个黄酮类化合物的代谢，本次发表的为代谢产物某流分的定性分析，该流分含有3个代谢产物，我们用Ultimate XB-C18柱和国外某名牌色谱柱对该流分进行了定性分析比较。
1.Chemical and reagents
  甲醇(色谱纯，天津大茂)，水(哇哈哈纯净水，杭州)，三氟乙酸(TFA, Dikma, USA)，其它试剂均为分析纯。
2.HPLC analysis of an unknown sample
    Waters 高效液相色谱系统，由Waters Model 600 controller液相色谱，Millennium 32 工作站，Model Delta 600 泵，以及Waters 996 DAD检测器组成。
    色谱柱：Ultimate XB-C18柱(5μm, 4.6x250mm)和国外某品牌色谱柱(5μm, 4.6x250mm)(用column X表示，投入使用约半年)
    流动相：A通道：甲醇，B通道：水(0.05%TFA)=(45:55, v/v)或A通道：甲醇，B通道：水(0.05%TFA)=(40:60, v/v)

    流  速：0.6mL/min
    柱  温：35℃
    检测波长：190-400nm扫描
    进样量：20μL
3.Sample preparation
    因为涉及保密内容，此部分略去。
4.Results and discussion

Fig.1 Chromatogram of sample solution analyzed by column X

Fig.2 Chromatogram of sample solution analyzed by Ultimate XB-C18 column

Fig.3 Chromatogram of sample solution analyzed by column X(Fig.1的局部放大图)

Fig.4 Chromatogram of sample solution analyzed by Ultimate XB-C18 column(Fig.2的局部放大图)

Fig.5 Chromatogram of sample solution analyzed by Ultimate XB-C18 column(流动相比例降低后)

    从图1和图2比较结果可以看出，该样品共含有3种黄酮类成分，DAD检测器给出其最大紫外吸收~270nm，~310nm，从紫外吸收还可以看出，这3种成分结构相似，其保留时间也很近。我们可以看出Ultimate XB-C18柱表现出了更好的分离度，而且展现了更好的峰形。
    图3和图4是图1和图2的局部放大图，可以观察到色谱峰的保留时间，图5是将流动相比例降低后用Ultimate XB-C18柱再次分析的结果，虽然没有完全达到基线分离，但结果也是不错的。
    该实验只是对代谢产物某流分中的3种黄酮类化合物进行定性分析，没有进行其它条件的考察，比如流动相加不同的酸，加酸的量(pH)，以及在乙腈水系统下进行考察，这些将在后续实验中补充。
5.Conclusions
    我们通过一个简单的定性实验，即中药某成分代谢产物的分析，比较了2种色谱柱对该流分中3种黄酮类化合物分离能力的研究，结果显示Ultimate XB-C18柱丝毫不落下风，反而表现出了神勇的分离能力。在未来的实验中，Ultimate色谱柱会一直伴随该项目的研究，我们会有更加精彩的结果发表出来，供大家分析讨论。