HPLC检测5种人工合成色素
描述部分
实验部分
样品提取
澄清饮品的提取较简单
准确移取样品2mL,置于25mL具塞管中,用水定容至刻度,漩涡振荡混合,调节合适的PH值,备用(如果样品成分简单,微膜过滤后就可上机测定,如果样品成分复杂,还得对样品进行净化处理)。
糕点、熟食等成分较复杂的样品的提取
准确称取样品2g,置于25mL具塞管中,用乙醇-氨水(V:V=70:30)定容至刻度,超声、离心提取,移去上清液15mL至蒸发瓶内,蒸发至5mL左右,加入20mL水稀释后,调节合适的PH值,待净化处理。
样品净化(固相萃取)
活化、平衡:依次向SPE小柱加入5mL甲醇,5mL超纯水
上样:待水在小柱上层筛板近干时,加入待净化液
淋洗:依次加入5mL超纯水,5mL 0.05% 甲酸-甲醇溶液,弃去淋洗液
洗脱:加入5mL 4%氨水-甲醇溶液,收集洗脱液
样品浓缩
洗脱液在50℃下氮吹仪吹至近干,再加水准确定容1mL,摇匀,微膜过滤,待上机测定。
检测器: 254 nm
流速: 1.0ml/min
柱温: 30℃
进样量: 20μl
流动相: A:0.02mol/L乙酸铵溶液, B:甲醇
梯度表
序号 | 时间(min) | 泵A(%) | 泵B(%) |
1 | 0 | 80 | 20 |
2 | 5 | 65 | 35 |
3 | 12 | 2 | 98 |
4 | 15 | 2 | 98 |
5 | 16 | 80 | 20 |
6 | 18 | 80 | 20 |
色谱图
图中: 1.柠檬黄 2.苋菜红 3.胭脂红 4.日落黄 5.亮蓝
某饮料检测的色谱图
2.苋菜红 4.日落黄 5.亮蓝
可见饮料中一般是含人工合成色素的,这种饮料中苋菜红含量较高,亮蓝含量也较高。