主题:【讨论】在什么情况下需要考虑添加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠

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huaibeijiayuan
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开发方法时,在什么情况下需要考虑添加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠,浓度如何选择
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原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
开发方法时,在什么情况下需要考虑添加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠,浓度如何选择


方法开发,当分离酸性或碱性样品时,需考虑加人缓冲剂控制流动相的pH
磷酸二氢钠的pH范围是4.2-4.6,磷酸氢二钠9.1-9.450g/L,25℃),具体选择哪种缓冲剂应先了解被分析物的PkapH值高于或低于分析物Pka两个单位的值,有助于获得好的峰形(溶液PH值高于或低于分析物的pKa两个单位时,化合物99%以一种形式存在,而一种形式存在的化合物才能获得好的峰)

1050mM浓度的缓冲剂对RPC分离一般足够(假定进样体积较小和/或样品对流动相PH的影响不很大)。较高的缓冲剂浓度(大于50mM)可以提供较大的缓冲容量,但在高%B的流动相中可能不溶;高浓度的缓冲剂也可能对不锈钢材质的HPLC系统操作不利。25mM的缓冲剂浓度通常是较好的折衷方案。
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2011/1/10 11:09:15 Last edit by godblesschina
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