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主题：【原创】液相色谱柱要经常用强溶剂冲洗，你做到了吗?【houjjun,jhjs,v2682789推荐】

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发表于：2013/07/20 22:55:51 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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液相色谱柱要经常用强溶剂冲洗，你做到了吗?



经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。

下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：

硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。甲醇能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。

反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略最后用水冲洗这一步。一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质，在甲醇（乙腈）冲洗时重复注射100~200µl四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲亚砜数次。此外，用乙腈、丙酮和三氟醋（0.1%）梯度洗脱能除去蛋白质污染。

阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗，阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗，除去交换性能强的盐，然后用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有机物）、甲醇、水依次冲洗。
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houjjun
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2013/7/20 23:40:27 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个是必要的，经常这么做对色谱柱会好些
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houjjun
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2013/7/20 23:42:03 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用强极性的溶剂冲洗，主要是针对反相色谱柱
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jhjs
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2013/7/20 23:48:35 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个很重要，得好好学习学习
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jhjs
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2013/7/20 23:49:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
用强极性的溶剂冲洗，主要是针对反相色谱柱
对，只有反相色谱柱才用强极性的试剂冲洗
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三人行
jncxyy2012
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2013/7/20 23:54:15 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
用强极性的溶剂冲洗，主要是针对反相色谱柱


硅胶柱也可用甲醇冲洗，洗去残留的强极性杂质，但是最后一定要用正己烷活化。
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2013/7/20 23:57:14 Last edit by jncxyy2012
houjjun
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2013/7/21 0:14:53 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 houjjun(houjjun) 发表:
用强极性的溶剂冲洗，主要是针对反相色谱柱


硅胶柱也可用甲醇冲洗，洗去残留的强极性杂质，但是最后一定要用正己烷活化。
对，硅胶色谱柱可以，树脂色谱柱就不能用有机溶剂冲洗了
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fengmo4668
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2013/7/21 12:27:45 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我一般都是一两个月才会这样做一次。经常做，没必要不说，还浪费试剂，浪费自己的时间和精力。
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jncxyy2012
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2013/7/21 12:41:15 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
我一般都是一两个月才会这样做一次。经常做，没必要不说，还浪费试剂，浪费自己的时间和精力。


只要能确保色谱柱正常做样就行。
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fengmo4668
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2013/7/21 12:46:37 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
我一般都是一两个月才会这样做一次。经常做，没必要不说，还浪费试剂，浪费自己的时间和精力。


只要能确保色谱柱正常做样就行。
一般感觉柱子不对劲的时候，就冲洗一次。平时正常使用时，就一两个月清洗一回。这样还能减少工作量。
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三人行
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2013/7/21 12:50:33 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
我一般都是一两个月才会这样做一次。经常做，没必要不说，还浪费试剂，浪费自己的时间和精力。


只要能确保色谱柱正常做样就行。
一般感觉柱子不对劲的时候，就冲洗一次。平时正常使用时，就一两个月清洗一回。这样还能减少工作量。


这样就和好，感觉有点不正常了再处理。
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2013/7/21 12:51:01 Last edit by jncxyy2012
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